水禽雷氏杆菌症不活化多价菌苗之研发与应用-家畜卫生试验所.PDF

43 家畜衛試所研報 No.43 ：43~52 (2008) 水禽雷氏桿菌症不活化多價菌苗之研發與應用 喻昭芳* 、黃金城、趙磐華 行政院農業委員會家畜衛生試驗所 摘要 本研究的目的為開發具保護力的水禽雷氏桿菌症 3 價不活化菌苗，以符 合市場防疫需求。首先進行菌株的蒐集、選定與鑑定，完成蒐集共 21 種血清型 菌株並製備高免血清，以利後續快速檢測鑑定田間流行型別，並初步選定近年 流行第 1 、2 及 6 血清型為未來研究菌苗株。接著著手菌苗最適生產條件建立， 及各種免疫效力提昇試驗，由結果可知不同培養基與培養時間對最終菌苗效力 影響不大，2 倍與 10 倍稀釋劑量對鴨隻保護效果不佳，多次菌苗效力試驗防禦 指數成績皆可達多種不活化菌苗國家檢定標準。最後使用 ELISA 檢測鴨血清抗 體方法建立，由預測趨勢線顯示，免疫 3 價菌苗後可引起鴨隻體內 3 型高抗體力 價。 關鍵詞：水禽雷氏桿菌症，不活化菌苗，效力試驗，ELISA 。 緒言 的蒐集、選定與鑑定，接着著手於菌苗最適生產條件 由 Riemerella anatipestifer (RA)引起的水禽雷氏 之建立，及各種免疫效力提昇試驗，最後則是使用 桿菌症為台灣重要的水禽傳染性疾病，鴨、鵝在 1~8 ELISA 檢測鴨血清抗體方法之建立。 週齡對本病最具感受性，主要引起病禽敗血症、全身 性漿膜炎、恢復禽隻生長遲緩及不合格屠體增加 材料與方法 [5] ，不良的飼養環境及其他疾病併發皆會造成本病 菌株的蒐集、選定與鑑定： 的爆發，發病率由 5%~75%[4] ，發病場常一再發 共蒐集 21 種不同血清型別菌株共 27 株，觀察 病，且清除不易而重複發生，造成業者經濟損失[5] ， 培養於血液培養基[Blood agar plate(TSA + 5% 脫 故發展有效菌苗防疫為一必然趨勢。本菌之血清型別 纖綿羊血},啟新]中菌落型態與細菌染色鏡檢，以及使 複雜，目前共有 21 種血清型[13] ，除了第5 與第 用市售細菌生化鑑定套組(API20NE,Biomerieux)生 2 、9 型間具微弱交叉反應外，其餘之間皆無交叉保 化鑑定，鑑定後號碼為 1010004 、0010004 或 護力，而造成預防上的困難[5] 。最理想的方式是突 0210004 判定為 RA 菌[10] ，確認本菌後，加上 破血清型別的限制，找出可產生保護力之致病或毒力 脫脂奶粉(Skim milk,Difco)保護劑分別冷凍乾燥(Beta 因子來開發菌苗防疫[3] ，但目前仍未有成果，所以 1,Christ)保存之。之後參照劉之方法[5] ，分別製備高 現階段施打有效的涵蓋愈多血清型別的多價菌苗，應