第2章微生物-病毒.ppt

动物病毒 实验动物 鸡胚 多种细胞培养 若标本经过适当稀释进行接种并辅以染色处理，病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域，即蚀斑（plaque）或称空斑。 植物病毒 敏感植物叶片 被感染部位的细胞快速死亡而形成局部坏死斑，或称枯斑 即便没出现坏死斑，被感染的植物仍会表现一定的病症，如色素形成和叶子形状改变等。 （盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等） 病毒纯化 标准：纯化的病毒制备物应保持其感染性，纯化的病毒制备物的理化性质应具有均一性 方法：主要化学组成为蛋白质，采用蛋白质提纯方法 具有一定的大小、形状和密度，采用离心 差速离心、梯度离心（超速离心） 食品微生物学 刘书亮 复 习 思 考 题 病毒与单细胞微生物之间的区别。 噬菌体与寄主细胞间的关系。 食品微生物学 刘书亮 ?病毒的主要类群 病毒几乎可以感染所有的细胞生物，并具有宿主特异性 噬菌体(phage):侵染细菌、放线菌等原核微生物的病毒 植物病毒(plant viruses) 动物病毒(animal viruses) 昆虫病毒( insect viruses ) 侵染其它微生物的病毒，如真菌病毒、藻类病毒、原生动物病毒 食品微生物学 刘书亮 （一）类病毒(Viroid) :是一个裸露的闭合环状ssRNA分子，它能感染寄主细胞并在其中自我复制使寄主产生病症。无mRNA活性，无蛋白质衣壳。 （二）拟病毒 （Virusoids）：存在于植物“真病毒”的颗粒中的小的环状RNA分子。“卫星RNA”。不能独立复制，必须依赖辅助病毒的协助。 ?亚病毒的化学组成 凡在核酸、蛋白质两种成分中只含有一种的分子病毒体，称为亚病毒。 食品微生物学 刘书亮 （三）朊病毒(PrionVirion) 1.定义： 一类不含核酸的侵染性蛋白质分子，通常称为PrP(prion protein) 2. 致病性： 引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病 羊瘙痒病 牛海绵状脑病（疯牛病） 库鲁氏病 克雅氏病 3. 朊病毒致病的可能机制 推测其致病机制是： prp存在两种类型，即在患病组织中的prpsc（致病型）和正常脑组织与患病组织中都存在的prpc（细胞型）。 两种蛋白的一级结构相同，但二级结构有很大差异，细胞型prp对蛋白酶敏感，无聚集能力，而致病型prp对蛋白酶有一定抗性，且可聚集成纤维状组织。 动物体内如果未被朊病毒感染，通常prpc不会自发转变为prpsc，而当被朊病毒感染后，患者体内的prpc会发生构象转变而成为prpsc。 朊病毒感染会导致多拷贝的朊病毒蛋白质的产生，是否违背“中心法则”？ 朊病毒的发现与思考 1）蛋白质是否可以作为遗传物质？ prion是生命的一个特例？还是仅仅为表达调控的一种形式？ 2）蛋白质折叠与功能的关系，是否存在折叠密码？ 食品微生物学 刘书亮 ?噬菌体 1、噬菌体形态 2、噬菌体的生长周期 食品微生物学 刘书亮 噬菌体形态 ?噬菌体有许多类型。有20面体；复合对称结构。基因组是DNA或RNA；单链(ss)或双链(ds)，环状或线状。已知的大部分噬菌体的遗传物质是dsDNA。 某些噬菌体非常小，如大肠杆菌ssRNA噬菌体MS2，只含有４个蛋白的基因组；而其他的大噬菌体如T4噬菌体，约135个不同的蛋白。 食品微生物学 刘书亮 ?复合体(complex) ? 20面体(icosahedron) ?丝状(filamentous) 以大肠杆菌T4噬菌体为例 头部：廿面体对称结构，由蛋白质衣壳构成，内含DNA。 颈部：薄盘状，附颈须。 尾鞘：长95nm, 衣壳粒螺旋对称；可伸缩。 尾髓:中空，DNA可由此进入细胞。 基板: 六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。 刺突: 有吸附功能。 尾丝: 有识别吸附功能。 大肠杆菌T4噬菌体构造 蝌蚪形噬菌体的构造（前面已讲） 食品微生物学 刘书亮 Electron Micrograph of Coliphage T4 Caption:-- T4 bacteriophage (DNA virus). 病毒的复制 病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸→细胞→复制与表达→产生子代病毒基因组和新的蛋白质→由新合成的病毒组分→装配成子代毒粒→并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称复制（replication） 吸附(absorption) 侵入(penetration) 复制(replication) 装配(assembly) 释放(release) 病毒复制周期 ?噬菌体的生长周期 食品微