刘斌：参芎化瘀胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1.pptVIP

模型组（×400） 喜得镇组（×400） 丹参组（×400） 参芎化瘀胶囊组（×400） 模型组缺血再灌注损伤后神经元细胞内BDNF大量表达，明显高于正常组及假手术组（P0.01）。提示血管性痴呆大鼠大脑受到缺血再灌注损伤刺激后，可能会应激性地激活脑组织内BDNF因子的表达，进而发挥修复神经元的作用，说明BDNF参与了血管性痴呆大鼠神经元细胞损伤的病理过程。 经药物治疗后的VD大鼠脑组织内BDNF的表达进一步增强，明显高于模型组（P0.01）,说明喜得镇、丹参、参芎化瘀胶囊能够能上调BDNF的表达，促进损伤神经元的修复。其中参芎化瘀胶囊修复神经元的作用要略优于喜得镇，与复方丹参的作用相当。 结 论 本实验采用动脉夹反复夹闭双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠的方法制备血管性痴呆模型成功。 大脑反复缺血再灌注损伤可导致血管性痴呆大鼠海马神经元细胞发生凋亡。 参芎化瘀胶囊可以改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力；可上调BDNF的表达，修复受损神经元细胞。其作用优于喜得镇，与复方丹参比较无明显差异。 谢 谢 * 参芎化瘀胶囊对血管性痴呆大鼠海马CA1区细胞凋亡及BDNF表达的影响  华北煤炭医学院附属医院神经内一科 刘斌 毛文静 马原源 血管性痴呆（Vascular dementia VD）是老年期痴呆的常见原因之一，严重威胁老年人的生存质量和生命，给家庭和社会造成沉重的负担。因此探讨血管性痴呆的发病机制与治疗已成为目前关注的热点。 血管性痴呆目前尚缺乏有效的药物治疗，参芎化瘀胶囊由人参、地鳖虫、川芎等组成，具有养血益气、化瘀通络等功效。其在血管性痴呆治疗中的作用及效果，还未见报道。 研究表明，脑缺血达一定程度和时间后可导致一系列的神经病理学、学习记忆和行为障碍。细胞凋亡参与缺血性细胞损害。 近年来的研究显示, BDNF为神经生长因子家族中的一员，可修复损伤神经元, 参与学习记忆过程。 本实验中，我们通过反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠降压法制备大鼠VD模型，模拟人VD记忆损害的病理过程，并给予参芎化瘀胶囊干预治疗，通过观察各组大鼠的行为学改变及海马CA1区形态学、神经细胞凋亡及BDNF表达的变化，探讨参芎化瘀胶囊治疗VD的疗效和机制，为其用于临床治疗VD提供实验室依据。 实验方法 1、实验流程 清洁级健康SD 大鼠（60只） 正常对照组 （10只） 模型组 （10只） 喜得镇组（10只） 复方丹参组（10只） 假手术组（10只） 参芎化瘀胶囊组 （10只） 制作VD模型 灌胃给药 （28天）、 行为学测试（第29天） HE染色 电镜检测 细胞凋亡检测 免疫组化染色 无任何处理 仅分离双 侧颈总动脉 处死 取脑 组织 标本 2、实验动物 清洁级健康SD大鼠60只, 雌雄各半, 体重200～250g，由中国医学科学院实验动物研究所供给，合格证号为SCXK(京)2005-0013。在华北煤炭医学院屏障环境动物实验室自由进食喂养。 3、大鼠VD模型的制备 采用改进的两血管阻断法，即用动脉夹反复夹闭双侧颈总动脉（共间歇阻断双侧颈总动脉血流3次，每次间隔10 min），同时腹腔注射硝普钠的方法制备血管性痴呆模型。 将大鼠麻醉、消毒后，颈部正中切口，分离双侧颈总动脉（CCA），夹闭双侧CCA之前，腹腔注射硝普钠（2.5mg/kg,用双蒸馏水溶解），随即用无创动脉夹夹闭双侧CCA,10min后,再通10min,共间歇阻断双侧CCA血流3次，每次间隔10min，再通后缝合伤口，放回笼中保温饲养。术后连续3d肌肉注射庆大霉素，预防感染。 分离双侧颈总动脉 夹闭双侧颈总动脉 4、大鼠记忆能力测试 采用Morris水迷宫实验测试。 试验包括：1）定位航行试验； 2）空间探索试验。 5、给药方法 各组参照《实验动物学》剂量给药 ： 正常对照组 给予0.9%生理盐水 假手术组 给予0.9%生理盐水 模型组 给予0.9%生理盐水 喜得镇组 给予喜得镇片0.6mg/kg 复方丹参组 给予复方丹参片0.27g/kg 参芎化瘀胶囊组 给予参芎化瘀胶囊0.48g/kg 以上各组均灌胃给药,每日1次,容量为1ml/100g，术后连续给药28天。 6、统计学方法 以EXCEL数据库整理后运用SPSS13.0统计软件进行统计处理，实验数据以均数±标准差表示。各组间比较使用单因素方差分析，以P0.05认为有统计学意义。 结果与讨论 1、行为学检测结果 1.1 各组大鼠定位航行实验结果 表1