两组分吸收光谱不重叠.PPTVIP

3. 结构式的推定 松香酸和左旋海松酸的分子式都是C20H30O2，经测定它们的结构应分别为下面的两个结构所示。UV测定松香酸的λmax=237.5nm(ε=16 000)，左旋海松酸的λmax=272.5nm(ε=7000)。确定它们的结构式。 4. 构象测定 （1）顺反异构体的判断 分子的几何形状可以影响共轭，使吸收波长有所变化，一般反式烯烃比顺式烯烃吸收波长要长。 4.构象测定 （2）互变异构体的判断 酮式 烯醇式 它没有共轭双键 它有共轭双键 故仅在末端 204 nm 故在 245 nm 处 处有一弱吸收 有强的 K 吸收带 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * * 仪器分析 供药学类、中药学类、制药工程及相关专业使用 全国普通高等中医药院校药学类专业“十三五”规划教材（第二轮规划教材） 第三章 紫外-可见分光光度法 目 录 第三章 紫外-可见分光光度法 第五节 定性与定量分析 一、定性分析 二、纯度检查 三、单组分定量分析方法 四、多组分定量分析方法 五、结构分析 一、定性分析 二、定量分析 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法 多组分的定量方法 定性和定量分析 一、定性分析 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 1．对比吸收光谱特征数据 最常用于鉴别的光谱特征数据有吸收峰?max和峰值吸光系数εmax和E1%1cm。 最常用于鉴别的光谱特征数据是吸收峰所在的波长?max。 它们的摩尔质量一般难以相同，因此它们εmax和E1%1cm常有明显的差别，所以吸光系数值也常用于化合物的定性鉴别。 一、定性分析 一、定性分析 不只一个吸收峰的化合物，可用在不同吸收峰处(或峰与谷)测得吸光度的比值作为鉴别的依据 2．对比吸光度（或吸光系数）的比值 一、定性分析 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 3．对比吸收光谱的一致性 一、定性分析 二、纯度检查 1．纯度检查（杂质检查） 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量（如乙醇中含有苯λmax=256nm，而乙醇在此波长处无吸收，乙醇中含苯量达0.001%，也可检查出来。） 2）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液，λ 310nm下测定规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 2．杂质限量的测定： 二、纯度检查 三、单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 1. 吸光系数法（绝对法） 前提：要求单色光 例 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度 解： 2. 工作曲线法 前提：固定仪器和测定条件 3.对照法 前提：固定仪器和测定条件 截距为0 标样与样品浓度相近 四、多组分的定量方法 1. 线性方程组法 2. 双波长法 3. 导数光谱法 (1) 两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 1. 线性方程组法 (2) 两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 1. 线性方程组法 (3) 两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 解线性方程组法 1. 线性方程组法 2. 双波长法 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 3. 导数光谱法 分子中生色团和助色团以及它们的共轭情况，决定了有机化合物紫外光谱的特征。因此紫外光谱可用于推定分子的骨架、判断发色团之间的共轭关系和估计共轭体系中取代基的种类、位置和数目。 1.初步推断官能团 2.化合物骨架的推