醒脑静对兔心肌缺血再灌注损伤抗炎性因子和改善凝血纤溶功能障碍作用.docVIP

醒脑静对兔心肌缺血再灌注损伤抗炎性因子和改善凝血纤溶功能障碍作用 　　摘要：目的探讨醒脑静预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的抗炎性因子的影响和改善凝血纤溶功能障碍的作用。方法20只新西兰兔随机分成安慰剂组与醒脑静组，各10只。结扎冠状动脉造成MIRI模型，分别在冠状动脉结扎前、结扎后1 h、再灌注后1 h，取心房血分别检测肿瘤坏死因子－α(TNF－α)、组织型纤溶酶原激活物(t－PA)、纤溶酶原激活物抑制物－1(PAI－1)、肌酸激酶(CK)水平。同时观察各组梗死范围。结果 冠状动脉结扎后醒脑静组TNF－α、PAl－1、CK水平较安慰剂组显著降低(P＜0.01)．心肌梗死面积显著小于安慰剂组(P＜0.01)。结论醒脑静预处理对MIRI有良好的抗心肌缺血再灌注损伤作用。 　　关键词：醒脑静；心肌缺血再灌注损伤；肿瘤坏死因子－α；组织型纤溶酶原激活物；纤溶酶原激活物抑制物－1 　　中图分类号：R542.2 R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672―1349(2007)04―0316―03 　　 　　随着静脉溶栓、经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)等技术治疗急性心肌梗死的广泛开展，心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI．)日益成为人们关注的热点。MIRI是心脏缺血性疾病和心脏手术体外循环致病的病理生理基础。心肌缺血预处理(ischemic preconditioning，IP)是指亚致死性缺血应激对随后较长时间心肌缺血再灌注损伤产生保护性耐受的现象。MIRI的药物性预处理及其作用机制的研究是一个热点，而中药对心脏保护作用的研究也愈来愈受到重视。本实验通过采用兔急性心肌缺血再灌注模型，观察醒脑静预处理对MIRI有抗炎性因子和改善纤溶，缩小梗死面积及良好的心肌保护作用。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1.l　1材料肿瘤坏死因子－α(TNF－α)、肌酸激酶(CK)试剂盒由美国杜邦公司提供；内皮素(ET)试剂盒由北京福瑞生物有限公司提供；一氧化氮(NO)试剂盒由南京建成生物工程公司提供；醒脑静注射液，每支20 mL，由无锡健宏药业有限公司提供。 　　1.2　动物分组新西兰兔20只，体重为(2.0～2.5)kg，雌雄不拘，由广东省医学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2003―0002。将动物随机分成安慰剂组与醒脑静组，每组10只。 　　1.3 给药方法实验前1 h给安慰剂组动物灌服生理盐水每只10 mL，醒脑静组每只静脉输注1 mL/kg。 　　1.4　动物模型[1，2]将兔用2％戊巴比妥钠25 mg/kg作全身麻醉，沿胸骨正中切口打开胸腔，取右房血。剪开心包膜，在冠状动脉前降支根部穿0号丝线，结扎之。关闭胸腔l h后，再开胸腔取右房血，放松结扎线，让心脏再灌注1 h，再取右房血。然后处死动物，取出心脏。 　　1.5　生化指标的测定所采血液离心后取血清，－20℃以下保存，测定结扎前(T1)、结扎后1 h(T2)、再灌注后1 h(T3)心房血TNF－α、纤溶酶原激活物抑制物－1(PAI－1)、组织型纤溶酶原激活物(t－PA)、CK水平。TNF－α水平测定采用放射免疫法，PAl－1、t－PA活性测定采用发色底物法，CK水平测定采用比色法。 　　1.6 心肌梗死范围测定 将心脏用生理盐水冲洗，切除心房，留下左心室，称重测定左心室质量(LV)。从心尖到心基部平行将兔心室切成(0.3～O.5)em厚的组织片，放在1％的TTC溶液中，在37℃中染色，(5～7)min后立即用水冲洗，梗死区不着色，非梗死区被染成红色。剪去非梗死区心肌，称重测定心肌梗死区质量(infarction area weight，I)及并计算I/LV(％)。 　　1.7　坏死心肌及周围心肌组织病理把心肌组织用1％甲醛固定，石蜡包埋，苏木精一伊红染色，光镜400倍下选择5个视野，观察心肌形态结构。 　　1.8　统计学处理数据以均数±标准差 　　表示，计量资料组间比较采用t检验，以P＜O.05为有统计学意义。 　　 　　2　结　果 　　 　　2.1　醒脑静对TNF－α、PAl－1、t－PA、CK的影响两组兔结扎前血浆TNF－α、PAI－1、t－PA、CK水平均无统计学意义。冠状动脉结扎后两组TNF－α、PAI－l、CK水平均升高，其中以安慰剂组最明显，与醒脑静组比较有统计学意义(P＜0.01)。而安慰剂组t-PA下降，与醒脑静组比较有统计学意义(P＜O.01)。详见表1。 　　2.3 醒脑静对兔心肌缺血再灌注损伤心肌形态的影响 安慰剂组有心肌间质出血、细胞变性、组织灶性坏死和炎性细胞浸润，有较大范围细胞凝聚、崩解。醒脑静组则仅有少量炎性细胞浸润和