高住低训对骨骼肌蛋白质合成作用及机理.docVIP

高住低训对骨骼肌蛋白质合成作用及机理 　　摘要：研究目的：模拟高住低训，测试并分析大鼠血睾酮、骨骼肌睾酮、骨骼肌ARmR―NA表达、骨骼肌总蛋白含量、骨骼肌MHC含量的变化，探讨高住低训，尤其是高住低氧对骨骼肌蛋白质合成的作用及其机理。研究方法：健康雄性SD大鼠40只，随机分为4组：常氧安静组、低氧暴露组、常氧运动组、高住低训组。常氧安静组在常氧环境下安静生活，低氧暴露组晚上在常压低氧帐篷中低氧暴露12 h，常氧运动组白天在常氧环境中进行耐力运动1 h，高住低训组在白天进行1 h耐力运动后，晚上在低氧帐篷中进行低氧暴露，运动和低氧暴露的方式和时间分别同常氧运动组和低氧暴露组。在实验第28 d取材测试指标。研究结果：1)常氧运动组比常氧安静组骨骼肌总蛋白质含量升高，有显著性差异(P0.05)，MHc含量明显升高，有非常显著性差异(P0.01)。2)低氧暴露组比常氧安静组血睾酮和骨骼肌睾酮含量下降，均有显著性差异(P0.05)。3)高住低训组比常氧运动组血睾酮、骨骼肌睾酮含量明显降低，骨骼肌总蛋白含量和MHc含量下降，均有显著性差异(P0.05)，腓肠肌湿重和体重明显下降，有显著性差异(P0.05)。4)各组骨骼肌睾酮含量的变化趋势与血睾酮的变化基本一致。结论：1)本研究选用的耐力运动模型有效地促进了骨骼肌蛋白质的合成代谢，在此基础上进行低氧暴露模拟高住低训研究骨骼肌蛋白质合成的调控是可行的。2)运动后进行低氧暴露降低睾酮水平，抑制蛋白质合成，可能是骨骼肌重量和体重下降的一个主要原因。3)血睾酮浓度在一定程度可反映骨骼肌睾酮含量的变化。 　　关键词：低氧；低氧运动；睾酮；ARmRNA；MHc含量 　　中图分类号：G 804.7文章编号：1009―783X(2009)05―0612―04文献标志码：A 　　 　　高住低训(living high-training low，HiLo)是美国学者莱文在高原训练基础上提出的一种低氧训练模式，近年来的研究报道主要集中在对影响有氧代谢能力诸因素的研究。高住低训主要用于耐力项目运动员提高有氧运动能力，高住低训期间运动员白天进行耐力训练，肌肉蛋白质分解增加，合成减少，存在蛋白质净降解现象，耐力运动后蛋白质以合成代谢为主，蛋白质合成增强的趋势一直持续到第2 d训练之前。运动员白天进行耐力训练后，晚上在低氧环境中休息是否抑制运动后骨骼肌蛋白质合成?高住低训是否可以避免高住低氧对骨骼肌的负面作用?这些都直接关系到运动员训练后的恢复、运动员力量、速度素质的保持或提高，所以为了全面完整地把握高住低训对机体作用的规律，尤其是高住低氧对蛋白质合成的影响是一个急待探讨的问题。 　　 　　因对运动员实施肌肉活检很困难，所以本研究以大鼠为研究对象，利用一个促进骨骼肌蛋白质合成的耐力运动训练模型，模拟高住低训，观察低氧和运动是否影响血睾酮水平，通过血睾酮影响骨骼肌睾酮含量、雄激素受体基因表达，最终影响骨骼肌蛋白质的合成，为了进一步证实低氧和运动对骨骼肌收缩功能的影响，本研究还测试了骨骼肌中肌球蛋白重链(myosin heavy chain，MHC)的含量，试图为高住低训期间运动员运动能力和肌肉力量保持和提高提供理论依据。国内外未见高住低训对骨骼肌蛋白质合成及作用机制的研究报道。 　　 　　1　研究方法 　　 　　1，1实验对象与分组 　　健康雄性、2月龄SD大鼠40只，体重180～200 g，随机分为4组：常氧安静组、低氧暴露组、常氧运动组、高住低训组，每组各10只。北京大学医学部实验动物科学部SPF级动物房中饲养。温度22℃～26℃，湿度30％～58％，自由进食及饮水。 　　常氧运动组和高住低训组先进行适应性跑台训练1周，然后进行正式实验4周，各组的生活、运动和低氧暴露方式具体见表1。 　　1，2测试样本采集与处理 　　第28 d各组动物出低氧帐篷后分别用25％乌拉坦麻醉后腹主动脉取血处死，常规制备血清，置于-80℃冰箱保存。快速取出腿部的腓肠肌，剔除脂肪和筋膜，用预冷的生理盐水洗净，滤纸吸干后称重，投入液氮中保存。 　　1，3指标测试与方法 　　1，3，1血睾酮 　　采用天津九鼎睾酮放免试剂盒，取标准品和血清样品按照试剂盒的操作步骤进行加样，利用美国Beckman DP5500型r计数仪直接读出样品浓度。 　　1，3，2骨骼肌睾酮含量 　　称取40 mg的腓肠肌，用眼科小剪迅速剪碎，按1：4的比例加入组织匀浆介质，匀浆20 sX3次，匀浆速度为13 000rpm，然后4℃，20 000 rpm离心20 min，取上清于-80℃储存待测。 　　采用北京华英HY-020睾酮放免试剂盒，取标准品和待测样品按照试剂盒的操作步骤进行加样，利用GC-911-r计数仪直接读出样品浓度。