中药中齐墩果酸和熊果酸的准确定量分析-Agilent.PDF

应用简报 小分子药物、仿制药 中药中齐墩果酸和熊果酸的准确定量 分析 高分辨率采样二维液相色谱 作者 摘要 Rongjie Fu 和 Xinlei Yang 质量控制是中药 (TCM) 行业中最重要的任务之一。在质量控制中，要求用 HPLC 方 安捷伦科技公司 法测定 TCM 中主要化合物的含量。鉴于 TCM 样品的复杂性，目标化合物有可能与 其他微量化合物在 HPLC 分离中发生共洗脱。二维液相色谱是一个采用正交色谱柱 化学键合相和流动相的强大方法，该方法可分离复杂样品。本应用简报详述了如何 开发用于翼首草 (Pterocephali Herbra) 中齐墩果酸和熊果酸定量分析的高分辨率采样 二维液相色谱方法。 前言 为实现正交分离，本应用简报使用两根选 实验部分 择性不同的 Agilent InfinityLab Poroshell 中药 (TCM) 分析是一项极具挑战的任 120 色谱柱（EC-C18 和 Phenyl-Hexyl）， 化学品和样品 务，因为无论是一种草药还是复方制剂， 并在高分辨率采样二维液相色谱中采用了 所有试剂和溶剂均为 HPLC 级。乙腈和 含有的成分都非常复杂。为控制 TCM 的 不同的流动相条件。在选定时间范围内收 甲醇购自 JT Baker, USA 。乙酸铵购自 质量，需要使用《中国药典》(CHP) 中规 集几个涵盖一维色谱图中整个峰面积范围 北京百灵威科技有限公司。新制超纯 定的 HPLC 方法测定其中主要化合物的含 的小体积馏分，以此测定两个目标化合 水产自 ELGA 水纯化系统，Lane End, 量。通常来说，其他化合物将与目标化合 物。每次切割都驻留在采样环中，并在第 UK。翼首草提取物以及齐墩果酸和熊 物发生共洗脱，从而影响定量准确度。 二维中对所有切割进行连续分析。这一模 果酸对照品由中国当地一家制药公司提 在《中国药典》中，翼首草是一个需要 式可确保所有选定化合物均转移至第二 供。将齐墩果酸和熊果酸同时溶于甲醇 用 HPLC 方法测定齐墩果酸和熊果酸（图 维，并在其中得到分析。因此，选定的共 中配制储备标准溶液，二者浓度分别为 1）两种目标化合物含量的示例。本研究 洗脱化合物都接受了高分辨率采样处理， 2.3 mg/mL 和 2.0 mg/mL。 发现，其他几种化合物会与齐墩果酸和熊 以在第二维中得到分析。如之前出版的技 果酸发生共洗脱，使现有方法不足以对这 术概述1 所示，这一操作可实现可靠的定 仪器 些化合物进行定量分析。 量分析。 Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱包括 以下模块： • 两台 Agilent 1290 Infinity II 高速泵 (G7120A) • Agilent 1290 Infinity II Multisampler