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响应面法在药物提取工艺优化中的应用
从药材中提取稳定的有效成分,保证药品量效关系的均一性和稳定性,是中药制造现代化的重要内容之一,因此,中药提取成为中药制造过程中极其关键的一环。提取过程中提取效率常常会受到提取溶剂、提取时间、溶液pH值等多种因素的影响,合理选用统计学方法,筛选出最佳工艺条件,已成为中药制造现代化研究的又一重要领域。
实验设计与优化方法,都未能给出直观图形且不能凭直觉观察其最优化点,虽能找出最优值,但难以直观判断优化区域。响应曲面法(reponse surface methodology,RSM)是由Box等于20世纪50年代提出的1种数据分析方法,它以回归方程作为函数估算的工具,在多因子试验中,因子与响应值的相互关系用多项式拟合,把因子和响应值的关系函数化,因此,可对函数的面进行分析,研究因子与响应值之间.因子与因子之间的相互关系,并进行优化。它是一种优化反应条件和加工工艺参数的有效方法,采用RSM法可以建立连续变量曲线模型,对影响过程的因子水平及交互作用进行优化和评价,同时运用图形技术将这种函数关系显示出来,可凭直觉的观察来选择实验设计的最优化条件。该方法具有简便,结果直观,预测性好等优点。
以下是响应面法在各种药物提取工艺优化中的应用。
1药物中多糖的提取优化
利用响应面分析法对白术多糖的提取工艺进行优化[1],在单因素实验基础上选取试因素与水平,根据中心组和实验设计原理采用3因素3水平的响应面分析法,根据回归分析确定各工艺条件的影响因子,以多糖提取率为影响值作响应面和等高线。在分析各个因素显著性和交互作用后,得出白术多糖水浸提的最佳工艺条件为:料液比1:24,浸提温度94℃,浸提时间3.3h,浸提2次;白术多糖实际提取率可达3.13%。
在用响应面法优化双孢菇菇柄多糖的提取工艺研究中,在单因素基础上,选择水料比、提取温度和提取时间为自变量,多糖提取率为响应值,根据Box-Behnken试验设计原理利用响应面法对双孢菇菇柄多糖的超声波法提取工艺进行优化研究。结果表明:超声波法提取双孢菇菇柄多糖的最佳工艺为:水料比44.94∶1、提取温度30.53℃、提取时间30.58 min,在此条件下理论最大提取率为20.15%。经过3次平行验证试验,证明该模型合理可靠,能够较好的预测超声波法提取双孢菇菇柄多糖得率[2]。
在响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖超声波提取工艺的研究实验里,通过单因素实验对影响蛹虫草菌丝体多糖提取的主要因素—提取时间、超声功率、液料比进行了探索,选取中心组合实验的范围和水平,应用响应面分析法对各因素的最佳水平范围及其交互作用进行了研究和探讨,建立了影响多糖提取率的二次多项数学模型,依据回归分析结果知,蛹虫草菌丝体多糖超声提取的最佳工艺条件为:提取时间504 s,提取功率466 W,液料比104∶1(ml∶g)。在此条件下,实际提取率7.45%,与模型理论预测值7.47%的相对误差为0.27%。该方法与传统水提法相比,提取时间缩短96%,多糖得率提高5.62%。实验结果证明,采用响应面分析法优化蛹虫草菌丝体多糖的超声波提取工艺条件准确可靠,具有实际价值。
研究地木耳多糖的水提法优化工艺[3]。方法: 采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖得率为考察指标,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对地木耳多糖提取工艺进行优化研究。结果: 提取温度、提取时间以及液料比与响应值地木耳多糖得率存在显著的相关性,最佳提取工艺条件:提取温度99℃,时间3.76 h,液料比52.1∶1,提取3次,在此条件下地木耳多糖得率理论值达到7.70%,验证试验的多糖得率为7.54%,地木耳多糖样品中多糖含量为53.5%。结论: 该优化工艺的多糖得率高,可用于地木耳多糖的提取。
2 药物中总黄酮的提取优化
确定小鱼仙草总黄酮的最佳提取工艺条件。方法: 以乙醇回流提取法提取小鱼仙草总黄酮,采用分光光度法测定总黄酮的含量,以总黄酮提取得率为考察指标,考察溶媒倍数、提取时间和提取次数等因素对小鱼仙草总黄酮提取得率的影响,利用响应面分析法优化提取工艺,确定总黄酮的最佳提取工艺。结果: 小鱼仙草总黄酮的最佳提取工艺为:加药材20倍量浓度为 70%乙醇,于 90℃水浴回流提取 3次,每次 1.9 h。此工艺下小鱼仙草总黄酮的提取得率达8.50%。结论: 该工艺提取得率高、操作简便,易于工业化大生产。
研究乙醇溶剂提取三叶青中总黄酮的最佳工艺条件[4]。方法以乙醇溶液为提取溶剂,采用响应面设计方法,对影响总黄酮提取效果的3个因素乙醇浓度(C)、液料比(R)、提取时间(t)进行中心组合设计试验,并建立数学模型,研究这些因素对黄酮提取率的影响。结果中心组合设计试验建立总黄酮提取率与乙醇浓度(C)、液料比(R)及提取时间(t)间的数学模型显著,
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