白色紫锥菊不定根培养及抗炎特性的研究-延边大学论文管理系统.PDF

学校代码：10184 分 类 号： 农学 硕士学位 论文 白色紫锥菊不定根培养及抗炎特性的研究 Adventitious Root Culture and Anti-inflammatory Property of Echinacea pallida 王洪秋 园艺学 延 边 大 学 分类号 密级 U D C 学号 2015010479 延边大学硕士学位论文 白色紫锥菊不定根培养及抗炎特性的研究 Adventitious Root Culture and Anti-inflammatory Property of Echinacea pallida 研 究 生 姓 名 王洪秋 培 养 单 位 农学院 指导教师姓名、职称 朴炫春 教授 学 科 专 业 园艺学 研 究 方 向 特种植物资源与生物技术 论 文 提 交 日 期 2018 年5 月25 日 延边大学硕士学位论文 摘 要 白色紫锥菊是具有极高药用价值和观赏价值的多年生草本植物。国内没有其 野生资源，且引种后不同地区人工栽培的白色紫锥菊品质差异较大，难以满足市 场需求。因此，以白色紫锥菊不定根作为产品生产的原材料具有十分重要意义。 为了提高不定根生物量和有效物质积累，本文对白色紫锥菊不定根培养条件 进行了优化。研究采用单因素和均匀设计试验对培养基组分进行了筛选。单因素 试验结果发现最佳的磷浓度为 0.94 mM，氮浓度为 45 mM ，硝态氮和铵态氮浓度 比为37.5 mM/7.5 mM 。采用 3 因素 （氮、磷和蔗糖）12 水平 （浓度）进行均匀 试验，发现不定根生物量和有效物质积累最佳的组合为氮浓度 45 mM 、磷浓度 1.56 mM和蔗糖浓度50 g ·L-1，总酚和黄酮生产量分别达到297.91 mg ·L-1 和211.94 mg ·L-1 。进一步利用生物反应器进行了不定根培养动态研究，发现 0~ 10 d 为不定 根生长的延迟期，10~30 d 为指数生长期，30~50 d 为平稳期。在培养 30 d 时不 定根生长和有效物质积累最多，鲜物重和干物重分别为 304.28 g 和 29.82 g，而 总酚和黄酮生产量分别达到 398.99 mg ·L-1 和 280.57 mg ·L-1 。因此，可确定 30 d 为白色紫锥菊不定根生物反应器培养的最佳培养周期。 在体外抗炎试验中，进行了不定根提取物对脂多糖（LPS ）诱导的小鼠腹腔 巨噬细胞（PMs ）促炎介质释放的影响研究。不同浓度提取物对几种促炎介质的 抑制程度有差异，但浓度为 100 μg·mL-1 时，对一氧化氮（NO ）、前列腺素 E2 （PGE2 ）、肿瘤坏死因子-α （TNF-α ）、白介素-1β （IL-1β）的产生以及诱导型一 氧化氮合酶（iNOS ）和环氧化酶-2 （COX-2 ）蛋白表达均具有显著抑制作用。进 一步，本研究探究了不定根提取物对核转录因子（NF ）-κB 和丝裂原活化蛋白激 酶（MAPKs ）两种信号