微生物检验技术知识点jmdFngiG.docVIP

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1微生物:是一群形体细小、结构简单、人肉眼看不见,必须借助于光学显微镜、电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能看到的生物。 2 微生物的种类:原核细胞型:细菌、放线菌、螺旋体、立克次氏体、支原体、衣原体; ? ? 真核细胞型:酵母菌、霉菌、微藻类等; 非细胞型:病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)。 3 病源微生物:感染人、动植物,导致疾病发生的有害微生物,称之为病原微生物。 4、微生物对产品的污染:对产品造成污染的微生物来源:土壤、空气、水、人和动植物、生产原料、生产器械及包装材料等 5 微生物检验的意义: 1)是衡量动植物性产品卫生质量的重要指标之一,也是判定被检产品能否食用的科学依据之一。 2)通过微生物检验,可以判断产品加工环境及产品卫生环境,能够对产品被微生物污染的程度作出正确的评价,为各项卫生管理工作提供科学依据,提供传染病和人类、动物和食物中毒的防治措施。 3)微生物检验是以贯彻“预防为主”的卫生方针,可以有效地防止或者减少食物中毒、人畜共患病的发生,保障人民的身体健康;同时,它对提高产品质量,避免经济损失,保证出口等方面具有政治上和经济上的重要意义。 6 微生物检验的范围与对象: ? 微生物检验lt;gt;范围 1.生产环境的检验:车间用水、空气、地面、墙壁等。 2.各种产品的原、辅料检验:包括食用动物、谷物、添加剂等一切原辅材料。 3.各类产品加工、储藏、销售诸环节的检验:包括食品从业人员的卫生状况检验、加工工具、运输车辆、包装材料的检验等。 4.产品的检验:重要的是对出厂产品、可疑产品及食物中有毒食品的检验. 微生物检验lt;gt;对象 7类 (1)食品 (2)化妆品 (3)药品 (4)一次性用品及其他生活用品(5)应施检疫的出口动物产品 (6)环境 (7)有关国际条约或其他法律、法规规定的强制性卫生检验的进出口商品 我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项 大肠菌群是指示水质受粪便污染的指示菌,细菌总数指示水体受污染物污染的情况。 微生物检验常规技术包括显微技术,染色技术,灭菌和消毒技术,培养基制备技术,接种,分离纯化和培养技术,无菌取样技术,微生物的计数技术,菌种保藏技术,微生物常规鉴定技术等 平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后,其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液涂在平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。 菌落形成单位cfu,colony-forming unit 。 疏水网膜法(HGMF):采用疏水网膜过滤样品,将捕获了被检微生物的疏水网膜上倾入适当的琼脂,经一定时间培养后即可计数 直接荧光过滤膜技术(DEFT):将样品经特殊滤膜过滤后,经吖啶橙染色,利用紫外线显微镜来快速测定活菌数。 葡萄糖苷酶荧光法:通过在培养基中加入指示剂、色素、荧光物质,成为快速检验大肠菌群的常用方法。 第二章 第一节 微生物检验的基本程序 1 检验前的准备 2样品的采集 3样品的送检 4样品的处理方法 5 致病菌检验参考菌群的选择 6样品的检验 7检验结果的报告 检验前的准备 1. 准备好所需的各种仪器:如冰箱、恒温培养箱、显微镜等 2. 按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌,冷却后送无菌室备用。 3. 准备好实验所需的各种试剂、药品,制备好普通营养琼脂或其他选择性培养基。根据需要分装试管或灭菌后倾注平板或保存在46℃ 的水浴中或保存在4℃ 的冰箱中备用。 4. 做好无菌室或超净工作台的灭菌工作,提前1h灭菌30~60min。 5. 检验人员的工作衣、鞋、帽、口罩等灭菌后备用。 6. 工作人员进入无菌室后,实验没有完成之前不得随便出入无菌室。 微生物实验室检验 lt;gt;流 程 无菌取样—样品均质—样液稀释—样品接种—恒温培养—结果观察 食品微生物检测 常规微生物项目:细菌总数、大肠菌群、酵母总数、霉菌总数,此类细菌不致病,但会严重影响食品的外观及风味。目前常用微生物培养法来计数菌落,允许有该类菌落,但菌落总数不能超标。 致病微生物项目:沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等。致病微生物在食品中是绝对不允许存在的,所以快速检测食品中是否存在有致病微生物,是食品安全检验的重中之重。 食品微生物检验lt;gt;指标 我国卫生部颁布的食品微生物lt;gt;指标有菌落总数,大肠菌群和致病菌三项。 1.菌落总数:菌落总数是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后所得1g或1mL检样中所含细菌菌落的总数。 2.大肠菌群:

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