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实验二 培养基的制备 消毒与灭菌 培养基配制实验原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。 人工制备培养基的目的,在于给微生物创造一个良好的营养条件。 培养基配制要素 营养:碳源、氮源、能源、生长因子、水分和无机盐; 适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力; 一定的氧化还原电位; 合适的渗透压。 培养基的分类 根据微生物的种类和实验目的的不同,培养基分类可以按以下方式: 按成分的不同分 按培养基的物理状态分 按培养基的用途分 按照培养基的成分来分 天然培养基:主要成分是复杂的天然有机物质 合成培养基:用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而成的培养基 半合成培养基:以天然有机物作为微生物营养来源的同时,适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基 按照培养基的用途分 基础培养基 营养培养基(加富培养基) 鉴别培养基:含有特定化合物或试剂。某种微生物在这种培养基上培养后,它所产生的某种代谢产物与这种特定的化合物或试剂能发生某种明显的特征性反应,根据这一特征性反应可以将某种微生物与他种微生物区别开来。 选择培养基:利用微生物对某种化学物质的敏感性不同,在培养基中加入这类物质,抑制不需要的微生物生长,而利用所需分离的微生物生长,从而达到分离或鉴别某种微生物的目的。 培养基灭菌 配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物 微生物生长繁殖: 消耗养分 改变培养的酸碱度 产生毒素或者抑制物 牛肉膏蛋白胨培养基的制备 应用最广泛的细菌基础培养基,普通培养基 牛肉膏: 3 g 蛋白胨: 10 g NaCl: 5 g 琼脂: 15-20 g 水: 1000 mL pH: 7.4~7.6 马铃薯培养基(PDA)的制备 用来培养真菌 马铃薯: 200 g 蔗糖(葡萄糖) 20 g 琼脂: 15-20 g 水: 1000 mL pH: 自然 马铃薯去皮,切成块煮沸30分钟,然后用纱布过滤; 滤液中加入糖和琼脂,溶化后补足水至1000 mL。 高氏Ⅰ号培养基的制备 用来培养放线菌 可溶性淀粉: 20 g KNO3: 1 g NaCl: 0.5 g K2HPO4·3H2O: 0.5 g MgSO4·7H2O: 0.5 g FeSO4·7H2O: 0.01 g 琼脂: 20 g 水: 1000 mL pH: 7.2~7.4 无氮培养基的制备 用来培养固氮菌 葡萄糖: 10 g KH2PO4: 0.2 g
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