卫生微生物实验课件.pptVIP

稀释 倍数 平均 菌落 数 例 次 两稀释度 菌落数之比 细菌总数 (个/g或个/ml) 报告方式 (个/g或个/ml) 10-1 10-2 10-3 2,760 295 46 2) 若两个稀释度的菌落数确立在30-300，则应视二者之比来决定，若比值小于2，应报告平均数。若比值大于2则报告其中较小的数字 37,750 3.8 ×104 2 3 1.6 2,890 271 60 2.2 27,100 2.7 ×104 稀释 倍数 平均 菌落 数 例 次 两稀释度 菌落数之比 细菌总数 (个/g或个/ml) 报告方式 (个/g或个/ml) 10-1 10-2 10-3 4 不可计 4,650 513 513,000 5.1 ×104 3) 若所有平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之 稀释 倍数 平均 菌落 数 例 次 两稀释度 菌落数之比 细菌总数 (个/g或个/ml) 报告方式 (个/g或个/ml) 10-1 10-2 10-3 5 27 11 5 270 2.7 ×102 4) 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以倍数报告之 稀释 倍数 平均 菌落 数 例 次 两稀释度 菌落数之比 细菌总数 (个/g或个/ml) 报告方式 (个/g或个/ml) 10-1 10-2 10-3 6 不可计 305 12 30,500 3.1 ×104 5) 如果所有稀释度的菌落数均不在30~300之间，其中一部分大于300，一部分小于30，则应以最接近30或300的平均菌落数计算。 稀释 倍数 平均 菌落 数 例 次 两稀释度 菌落数之比 细菌总数 (个/g或个/ml) 报告方式 (个/g或个/ml) 10-1 10-2 10-3 7 不可计 不可计 不可计 10-3无法计数 6) 若所有稀释度的菌落数均不可计数，则以最高稀释倍数无法计数报告之 （二）水的大肠菌群数的检测（2人/组） 1 原理 大肠杆菌是人和动物 肠道中主要细菌，由于它在肠道中数量较多，在肠道外抵抗力较强，容易检出，故大肠杆菌常作为粪便污染指标，也间接表明有肠道致病菌的污染。 2 材料 检材：水源水（实验室提供） 10ml 无菌吸管1支/组，1 ml无菌吸管1支/组。 乳糖胆盐发酵管：初发酵9支/组，做好标记（实验室提供），复发酵9支/组（自己制备） 伊红美兰琼脂培养基（EMB平板）一块/组。 其他：显微镜、酒精灯、接种环、载玻片、G染色液等 3 方法与步骤 大肠菌群的检验程序 采样 稀释 初发酵：乳糖胆盐发酵管，37 ℃ ×18-24h 不产酸、产气 产酸、产气 结论：大肠菌群阴性 EMB平板， 37 ℃ ×18-24h 革兰氏染色 复发酵：乳糖胆盐发酵管， 37 ℃ ×18-24h G+ G-无芽孢杆菌 产酸、产气 不产酸、产气 结论：大肠菌群阴性 结论：大肠菌群阳性 结论：大肠菌群阴性 操作步骤 ① 初发酵试验 用1 ml无菌吸管吸取10-2样品1 ml ×3 用1 ml无菌吸管吸取10-1样品1 ml ×3 用1 ml无菌吸管吸取原样1 ml ×3 10 ml乳糖胆盐发酵管 10 ml乳糖胆盐发酵管 10 ml乳糖胆盐发酵管 37 ℃ ×18-24h培养 ×3 ×3 ×3 ② 在指示性培养基（EMB平板）上分离培养 产酸产气的发酵管 平板划线接种法 EMB平板（9等分） 37 ℃ ×18-24h培养 2 1 3 4 5 6 7 8 9 EMB平板：伊红、美兰平板 原理：大肠杆菌因分解乳糖产酸使PH降低，致使伊红与美兰结合成紫红色化合物，故菌落呈紫黑色且有金属光泽。但在碱性环境中，伊红与美兰不能结合，故不分解乳糖的致病性肠道杆菌的菌落为无色、半透明。 紫黑色带金属光泽大菌落— 大肠杆菌菌落 无色半透明小菌落— 肠道致病菌菌落 ③ 革兰染色镜检，复发酵试验 EMB平板上挑取1-2个大肠菌群可疑菌落（紫黑色有金属光泽） 革兰染色镜检 乳糖胆盐发酵管 （9支，复发酵