微免实验课件.pptVIP

3. 靛基质试验（吲哚试验） 某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质本身无色，但加入对二甲基氨基苯甲醛（吲哚试剂）作用后形成玫瑰红色的靛基质。 -：黄色 +：红色 4. 尿素酶试验 有些细菌具有尿素酶，能分解尿素形成大量的氨，使培养基PH上升呈碱性，使指示剂变色。 ? 指示剂为酚红 -：淡红色 +：深红色 沉淀生长 混浊生长 表面生长 细菌的生长现象 液体培养基： 半固体培养基： 细菌的生长现象 混浊生长 有鞭毛细菌 观察细菌的动力 无 鞭 毛 细 菌 线状生长 培养基 白喉棒状杆菌 培养特性： 在亚碲酸钾血琼脂平板（鉴别选择培养基） 上生长，能吸收碲盐还 原为元素碲，使菌落呈 黑色。 亚碲酸钾血琼脂平板 亚碲酸鉀的血平板 毒力检测：Elek平板 白喉棒状杆菌 在琼脂平板中央贴一条浸有白喉抗毒素的滤纸条，垂直接种待检菌，培养48h，观察有无白色沉淀线形成。 Elek平板 培养特性：可在普通琼脂培养基上生长，形成灰白色粗糙型菌落，低倍镜下可见卷发状边缘。 炭疽芽胞杆菌 肠道非致病菌分解乳糖产酸，菌落呈红色，较大。 肠道致病菌不分解乳糖，呈半透明的淡黄色菌落，较小。 示教 SS培养基 （肠道菌的选择鉴别培养基） 大肠杆菌在SS平板上(棕红色,发酵). 伤寒杆菌在SS平板上(淡黄色,不发酵) 双糖铁培养基 成分： 乳糖 硫酸亚铁 酚红（酸黄碱红） 葡萄糖 上层 （固体斜面） 下层 （半固体） 分解乳糖、H2S 分解葡萄糖、动力 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 白色葡萄球菌(呈白色) 金黃色葡萄球菌 肺炎双球菌(草绿色溶血环,自溶). 甲型溶血性链球菌 乙型溶血性链球菌 甲型溶血 乙型溶血 丙型溶血性鏈球菌 甲型溶血性链球菌(草绿色溶血环,无自溶) 破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 血琼脂平板上：双层溶血环（θ、α毒素），“靶样溶血” 血平板（双层溶血环） 庖肉培养基（淡红/肉红色） 牛乳培养基－汹涌发酵 结核杆菌：罗氏培养基 酵母型菌落 类酵母型菌落 细菌的生化反应 各种细菌所具有的酶不同，对营养物质的分解能力也不同，因而可利用生物化学的方法来测定微生物的代谢产物（酸碱、气）、代谢方式和条件等，以此来鉴别细菌的类别、种属。 常用酸碱指示剂： ? 指示剂为酚红 十 + － － － 糖发酵实验 产酸产气：指示剂变色，小倒管内有气泡；以 表示 产酸： 指示剂变色，以+表示 不分解糖：指示剂不变色，以－表示 十 2. 硫化氢试验 某些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸），产生硫化氢，硫化氢遇铅盐或铁盐形成黑色硫化铅或硫化亚铁沉淀物。 －：不变色 +： 黑色 － + Giemsa染色 呈紫红色，比红细胞长数倍，螺旋数目少，3-10个，呈不规则弯曲，弯曲平滑大于90度。 疏螺旋体属—回归热螺旋体 微生物检查时取发热期的血液样本。 密螺旋体属—梅毒螺旋体 镀银染色 呈棕褐色，螺旋数目多，8-14个，排列规则紧密。 钩端螺旋体属—钩端螺旋体 镀银染色 呈棕褐色，一端或两端弯曲呈钩状，常呈C、S型，螺旋最为细密而规则，镜下不清楚。 沙眼衣原体包涵体 Giemsa染色 眼结膜上皮细胞的胞浆近胞核处呈紫色或蓝色，帽型、桑椹型或散在的包涵体。 培养特性：专性真核细胞内寄生和繁殖。 致病性：沙眼、泌尿生殖道感染、肺炎等。 发育周期与形态： 原体：球形，直径0.3?m，有传染性，无繁殖能力； 始体：圆形或椭圆形，直径0.5-1?m，较始体稍大，无传染性，以二分裂方式繁殖。 衣原体 chlamydia 沙眼衣原体包涵体 Giemsa染色 眼结膜上皮细胞的胞浆近胞核处呈紫色或蓝色，帽型、桑椹型或散在的包涵体。 立克次体— 恙虫热立克次体 Giemsa染色 单核细胞的胞浆内近细胞核旁，成堆的紫红色球杆状的立克次体。 新生隐球菌（墨汁负染） 假丝酵母菌 芽生孢子 厚膜孢子 大分生孢子 大分生孢子 细菌的特殊结构 消毒灭菌的方法 物理方法： 高压蒸汽灭菌（高压蒸锅等）：耐高温和潮湿的物件，如培养基，生理盐水，织物，玻璃器材等 干热灭菌（烤箱，160℃）：玻璃器材 紫外线（人工紫外灯操作台）：培养基，空气 过滤除菌（滤菌器）：去除液体空气内细菌（不耐热液体），分离微生物或毒素 化学消毒：化学消毒剂，如酒精，碘酒，氧化消毒剂等 药敏试验 测定细菌对药物敏感性 取G+/G-菌液1环（无菌操作！） 连续划线，使细菌密密涂满于平板表面 均分四区，镊子灭菌后分别夹取四种抗菌药片贴于琼脂表面（注意距离） 贴上标签，倒放，置37度孵箱培养18-24h，测量抑菌圈直径 划线分离 取混合菌液1环（注意无菌操作！） 持接种环来回连续划线（