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细菌对抗菌药物 敏感试验 antimicrobial suceptibility test AST 第一节 抗菌药物 一.抗菌药物 能抑制或杀死微生物 有一定的毒副作用 有一定的抗菌谱 细菌可对其产生耐药性变异 抗生素: ?-内酰胺类抗生素: 青霉素,头孢菌素,其他?-内酰胺类抗生素, ?-内酰胺类酶抑制剂 氨基糖苷类 大环内酯类 二.常用抗菌药物种类 抗菌药物 磺胺药 喹诺酮类 呋喃类 甲硝唑 药浓度 MIC 不同菌株 血药浓度 治疗剂量 中毒剂量 耐药株 敏感株 一.概述 耐药性形成是因为细菌的基因突变或获得了耐药基因 耐药性可在株间,种间传递 抗菌药物仅对耐药菌起选择作用 细菌对抗菌药物的耐药性可以是多重的 细菌对结构相似药物间, 可有交叉耐药性 二.耐药性产生机制 ?-内酰胺类酶形成:破坏?-内酰胺类药物,有多种 钝化酶: 使抗生素失活,如氨基糖苷类 靶位改变:形成新的,低亲合力的青霉素结合蛋白 渗透障碍或外排作用:使药物不易进入菌细胞内 代谢途径改变:绕过药物作用环节 第三节 细菌对抗菌药物的 敏感性试验 一.药敏试验目的 指导被试患者用药 某一地区的耐药性调查 鉴定细菌 新药评价 二.药敏试验原理 将细菌接种在无被测药拮抗剂并能提供细菌良好生长的环境中 加入一定量抗菌药物 观察细菌生长被抑制情况 三.被测药物选择 按菌种和抗菌谱 同类药物选一个 按医生要求 按医院感染科规定 四.药敏试验方法 1.稀释法 可在液体或固体培养基中进行 用培养基对抗菌药物作一系列稀释 加入一定量细菌 孵育后读取MIC 转种未生长管并计数细菌后读取MBC 药 50 25 12.5 6.3 3.2 1.6 0.8 0.4 0 加入等量细菌, 孵育18-24h 结果 － － － － + + + + + 1 2 3 4 5 6 7 8 C 计数 0 105 368 760 /ml 48万* MIC 6.3 μg/ml MBC 12.5 μg/ml ( ＜0.1%×480000＝480) *接种时菌数 μg/ml 药 50 25 12.5 6.3μg/ml 3.2 1.6 0.8 C 生长 MIC 1 ＜0.8 2= 6.3 3 =25 4 = 12.5 5= 1.6 μg/ml 1 2 3 4 5 也可用单一浓度进行。如对甲氧西林,万古霉素等耐药性测定 或用两个浓度进行,如区分中介和耐药浓度 也可用机器进行 附:血清抗菌活性测定 将患者血清作系列稀释 测自身感染部位分离出的病原菌的最低抑菌和杀菌效价 2.纸片琼脂扩散法(K-B法) 以一定量细菌在平板表面紧密接种,让其长成均匀的菌苔 置数张含定量抗菌药物的纸片于其上,其间需有一定间距 孵育后测定抑菌环直径 抑菌环大小和MIC的高低呈负相关 MIC渐高 抑菌环渐大 血药浓度 耐药 敏感
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