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二、动物基因工程前景广阔 1.用于提高动物生长速度 2.用于改善畜产品的品质 3.用转基因的动物生产药物 4.用转基因的动物作器官移植的供体 5.基因工程药品异军突起 转基因动物的乳腺。 就基因药物而言,最理想的表达场所是哪里? 是指把人或哺乳动物的某种基因导入到哺乳动物(如鼠、兔、羊和猪)的受精卵里,目的基因若与受精卵染色体DNA整合,细胞分裂时,该基因随染色体的倍增而倍增,使每个细胞中都带有目的基因,使性状得以表达,并稳定地遗传给后代,从而获得基因产品。这样一种新的个体,称为转基因动物。 什么叫转基因动物? 1)乳腺是一个外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响转基因动物本身的生理代谢反应。 2)从乳汁中获取目的基因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性。 3)从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可无限繁殖。 为什么乳腺能成为基因药物最理想的表达场所呢? 在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、干扰素直接生物体的哪些结构中提取? 药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。 传统生产方法的缺点 由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。 可利用什么方法来解决上述问题? 利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,用该方法生产的胰岛素产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%~50%。 基因工程药品 —— 胰岛素 什么叫基因工程? zxxk 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术. (一)基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人们需要的新的生物类型和生物产品 切割 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 获取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么? 基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三: 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 大肠杆菌(EcoRΙ)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制酶 黏性末端和平末端 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端。而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的则是平末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端? 要切两个切口,产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢? 会产生相同的黏性末端,然后让两者的黏性末端黏合起来,就似乎可以合成重组的DNA分子了。 2. DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)? 导入过程需要运输工具——载体。 载体的作用有哪些? 作用一:作为运输工具,将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。 作用二:利用载体在受体细胞(棉花细胞)内,对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。 作为载体必须具备哪些条件? 1)能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2)载体DNA必须有一个或多个限制酶切点,以便目的基因插入到载体上去。 3)具有某些标记基因,便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 载体DNA必须是安全的,不会对受体细胞有害,或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去; 5) 载体DNA分子大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大就不便操作. 3.基因进入受体细胞的运载——”分子运输车” 常用的运载体主要有两类: 1)细菌细胞质的质粒 2)噬菌体或某些动植物病毒 质粒: 质粒是一种裸露的、结构
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