2.2.1动物细胞培养和核移植技术——上课.pptVIP

将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 二、动物体细胞核移植技术 动物的细胞核具有全能性 1、概念： 2、核移植的种类 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 （易） （难） 学习活动三：思考探究 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛，平均每年产量为十几吨，而我国平均水平仅有3－4吨。 你能想办法繁殖卢辛达的后代，使年产奶量为30.8t吗？ （MⅡ卵母细胞） 减数第二次分裂中期 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 激活受体细胞，完成细胞分裂、发育 胚胎移植 代孕母牛子宫 克隆牛 3、过程： 体积大、易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养条件 保证核移植动物的遗传物质来自供体细胞 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 去核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植 胰蛋白酶水解蛋白质 胃蛋白酶最适PH约为2.在PH为7的环境下已经失去活性 50代细胞以后，细胞发生了癌变 1997年7月5日，世界上首只体细胞克隆哺乳动物诞生多利实施安乐死。这是2003年，多利享年6岁，是正常绵羊寿命的一半 。2007年，科学家成功地将皮肤细胞转化为干细胞――不需要卵细胞、不需要核转移、不需要胚胎、不制造成体。虽然仍不断有克隆成果问世，但干细胞技术似乎更有前途，甚至连威尔穆特也改弦易辙，他宣布放弃核转移克隆技术，转向成体干细胞领域。 生活联系： 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 最基础的是 ——动物细胞培养技术 动物细胞工程常用的技术： 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 自主阅读P44第5段，思考下列问题： 1、什么叫动物细胞培养（animal cell culture)？ 2、动物细胞培养的原理是什么？ 一、动物细胞培养 1、概念：从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 原理： 细胞增殖 如何进行动物细胞培养? 放入二氧化碳培养箱中培养 动物细胞培养过程示意图 结合问题，阅读书本，四人一组，讨论写出动物细胞培养的流程图。每组推选一位“小老师”，准备上台讲解（5min) 学习活动一： 合作学习（结合问题思考流程） 1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？ 2、如何将动物组织分散成单个的细胞？ 3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物 质主要是什么成分？ 4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？ 5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 营养易供应、代谢废物易排出、方便对细胞进行操作。 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 水解蛋白质 蛋白质 细胞贴壁 接触抑制(contact inhibition) 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 要求： 相关概念： 原代培养：通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养：原代培养的细胞出现接触抑制后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖。这样即为传代培养。 有关概念： 1、选用组织时，一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料，而不用老龄动物的，这是为什么？ 生命力旺盛，分裂能力强。 学习活动二：寻根问底，加深巩固 2、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理组织吗? 不能，胃蛋白酶pH=2.0，胰蛋白酶的pH=7.2-7.4,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的pH较接近。 学习活动二：寻根问底，加深巩固 3、动物细胞培养能否最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 学习活动二：寻根问底，加深巩固 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 原代培养 传代