趋化因子受体CXCR4+shRNA真核表达载体的构建及其在真核细胞中的表达.pdfVIP

第1章引言 RNA干扰(RNA 链RNA介导序列特异的mRNA降解，这种机制在多种生物中发现，并且在哺 乳动物中可以遗传【协141。在对单一基因的功能可通过基因敲除，反义核苷酸， 核酶等方法进行研究，但基因敲除技术较为复杂，对设备要求高，所需时间及 费用较高，反义核苷酸及核酶技术特异性及效果并非理想。而RNAi技术是一种 非常有效的基因敲除方法，具有快速、高效和高特异性等优点，经过几年的技 术发展，已成为在抑制目的基因表达的一种成熟有效的方法，广泛应用于功能 基因组学，信号通路分析，药物靶点筛选的研究中。 本研究构建人CXCR4RNA干扰表达载体，并试验性转染人单核细胞白血 对白血病转移的影响以及CXCR4特异性shRNA真核表达载体的基因治疗奠定 基础。 2 第2章材料和仪器 第2章材料和仪器 2．1主要材料 DH5 DNAMarker、限制性内切酶XhoI、MluI、T4连接酶、E