人源抗！#$%单链抗体在巴氏毕赤酵母中的表达.PDFVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! ’( ) ! *’ ) ! 年 月 #$$% ! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-.,/0 #$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人源抗!#$% 单链抗体在巴氏毕赤酵母中的表达 ! # # # # ! ! ! 熊 盛 任向荣 唐永红 粟宽源 余宙耀 罗 勇 王一飞 李久香 ! # （暨南大学生物医药研究开发基地，广州 ；解放军 医院全军传染病中心，广州 ） 6!$4%$ 362 6!$43$ 摘 要 在 中分泌表达非融合抗 单链抗体（ ）。设计引物从 上扩增目的基 3 ) 4 +/(*# CDE5F CDEB:G HIJ1CDEB:G 因，亚克隆至 3 ) 4 +/(*# 表达载体HKLMN 5 中，线性化后转化 3 ) 4 +/(*# IO!!6；转化子经菌落KMP、高浓度N8’B- 抗 ! 性筛选鉴定后，甲醇诱导目的蛋白表达。结果发现，重组CDEB:G 可以在 因子的引导下，分泌至培养基中，产量为 ! 2$=FQ R；分泌至培养基中的CDEB:G 具有结合CDE5F 活性，活性总量在诱导培养9#S 后达最高峰，在诱导培养后期， 活性下降； 糖显色结果表明，酵母表达 是一种低糖基化蛋白或非糖基化蛋白。 CDEB:G K5O CDEB:G 关键词 乙型肝炎，单链抗体，巴氏毕赤酵母，表达 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） T924 5 !$$$1%$4! #$$% $!1$$!1$6 乙型肝炎病毒感染是全球性公共卫生问题，能 ：： ）及 均购自 公司。 # 9:;6 5 ) 0(,# 7WK!$ L-GX/’F8- 和乙肝病毒表面特异性位点结合并封闭其侵袭肝细 引物：用于扩增 的引物： ， ’ ’( CDEB:G K! 6Z1MI 胞活性的抗体和抗体片段是唯一能用于紧急预防的 I5577M M5II7IM7II7II5I7M7III1%Z，其中划线部 ［］ 生物制品! 。现在使用的乙肝表面抗体（ ）均 CDE5U 分为引入的