2.2-DNA-复制.pptVIP

复制叉的形成 GATCTNTTNTTTT TTATNCANA 3×13bp直接重复序列 DnaA结合位点，4×9bp 大肠杆菌DNA复制起始点（oriC）保守序列分布图 复制叉的形成 互相缠绕的双链母本DNA，复制从特定的位置(复制原点Ori or O)开始，该位置常是富含A、T区段。 复制叉的形成 DnaA蛋白可识别复制起点并与之结合，这是随后起始事件的基础。 一旦结合复制起点DNA， DnaA蛋白会获得额外的性质：1、可促进DNA扭曲，使螺旋酶能进入；2、可帮助其它与复制叉组装有关因子进入。 复制叉的形成 DnaA蛋白作用于oriC左侧的的3个13bp的串联重复序列，使这3个13bp解链，这个过程需能（ATP）； 端粒（Telomere）：真核细胞内染色体末端的蛋白质-DNA结构，其功能是完成染色体末端的复制，使染色体免遭融合、重组和降解 。 端粒酶(Telomerase) 　 一种核糖核蛋白（RNP），由RNA和蛋白质两种成分组成，催化端粒DNA的合成，能够在缺少DNA模板的情况下延伸端粒寡核苷酸片段。 端粒酶是一种特殊的DNA聚合酶：（既具有蛋白质也有RNA分子，该RNA携带关键模板信息！） 自身携带RNA模板的反转录酶 人大多数细胞缺乏端粒酶，端粒长度随衰老而缩短，而生殖/种系干细胞则保留端粒酶；这是衰老原因。 肿瘤细胞具有端粒酶活性。 primer ( DNA聚合酶不能发动子链DNA的复制起始 ) E.coli [Rif s ] [Rif S ] + M13 E.coli E.coli [ Rif R ] M13+ S.S. DNA virus + RF 无M13 RF Rifampin M13 Rifampin 有M13 RF 有M13 RF M13 Rifampin Rifampin 是E.coli RNA polymerase 的抑制剂 M13 RF的形成需要 RNA polymerase发动合成一段 RNA分子作为引物 RF启动后，Rifampin 的抑制无效 Conclusion DNA复制的转录激活 (transcriptional activation） RNA polymerase [ Rif S ] 10 Nt RNA primer for leading Strand origin dnaG primase [ Rif R ] for lagging Strand DNA新起始方式（de novo initiation）复制的基本模式 Parental D.S,DNA Unwinding protein RNA polymerase Primase DNA polymerase leading Strand lagging Strand Elongation of lag. lea. strands DNA polymerase Poly(dNt) ligase Replication loop RNA primer RNA-primed DNA pieces (1kb) Continuous 5’ to 3’ in Leading S. Discontinuous 3’ to 5’ in lagging S. Two long DNA pieces Many shorter DNA pieces (1-2 kb) Repair filling in 5’ to 3’ Bidirectional lengthening of new stands primosome Synthesis of progeny strand in lagging DNA ppp RNA as primer DNA polymerase III ppp DNA polymerase I DNA ligase RNApol (RNA polymerase) [ Rif S ] dnaG (primase) [Rif R ] 完成对后随链引物的合成 完成10 ±NtRNA引物合成后. DNApoIII进行DNA链的延伸 DNApol I（RNase H） 对后随链的RNA引物切除并聚合填补 连接酶 (ligase