利用ATPase基因研究杂交多倍体鲫鲂线粒体母性遗传-国家自然科学.PDF

1048 　 18 　9 　2008 9 ＊研究简讯 ＊ 利用ATPase 基因研究杂交多倍体 鲫鲂线粒体母性遗传＊ ＊＊ ＊＊ ＊＊＊ 颜金鹏 　郭新红 　刘少军 肖　俊　刘　筠 , , 410081 摘要　　三倍体鲫鲂、 四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂是通过红鲫♀× 团头鲂 ♂亚科间远缘杂 形成的. 采用PCR 产物直接测序法, 测定了5 尾三倍体鲫鲂、6 尾四倍体鲫鲂和6尾五倍体鲫鲂及其1尾父本 团头鲂的线粒体 NA ATPase8 和ATPase6基因的全序列, 并与所获得的红鲫和外群斑马鱼的同源序 列进行比较, 同时分析了其碱基组成、 变异情况以及核苷酸和氨基酸序列差异.红鲫、 团头鲂、 三倍 体鲫鲂、 四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂之间的序列分歧率为0.0%—21.6%, 它们与外群斑马鱼之间的序 列分歧率为27.0%—28.2%.用MEGA 3.1 软件中的Maximum parsimony(MP), Minimum evolution (ME), Neighbor joining (NJ)和UPGMA 程序构建的分子系统树具有相似的拓扑结构.结果表明, 人 工杂 三倍体鲫鲂、 四倍体鲫鲂和五倍体鲫鲂在线粒体ATPase8 和ATPase6基因上具有严格的母性 遗传特征.研究证明ATPase8和ATPase6基因是杂 多倍体鲫鲂遗传变异研究的一个很好的分子标记. 关键词　　ATP ase 　　　　 　　、 . 124, . , . [1—3] .(♀, Car assi um , . aura t us red var.)×(♂, Cy p r in us carp io , , L.), . [3—5] ., [6] ( ♀, (5n=172) . 2n=100× ♂, M eg a lobrama amb ly cep ha la, . 2n=48), 、、 [6] . 、 、, . 172, , , 　2008-03-02 ;2008-04-23 　 ＊(、 (:2007CB109206)、 (:200405422001)、 (:IRT 0445)、 (:2005380)(:2006NK2008) 　＊＊ ＊＊＊, E-mail:lsj@hunnu.edu.cn 　18 　9 　2008 9 1049 . 5′-GTTAGTGGTCATGGGCTTGGATC-3′.PCR NA (mt NA ) ATPase8 ATPase6 、 Lys NA ., tRNA COIII . , , , 50 μL, H2O 25.6 μL, 10 × [7] . 5μL, MgCl2 (25mmol/L)4μL, dNTPs 10μL ( ATPase8/6 , 0.2 mmol/L), Taq (2.5 U/μL)0.8μL, 、 NA 20ng, 、 1.2μL. [8] .Kontula AT- :94 ℃4min;94 ℃45s, 53℃ Pase8/6 Cottoid 45 s, 72℃90 s, 6 ;94 ℃