大豆疫霉细胞凋亡相关基因的鉴定与表达分析-植物保护学报.PDF

植物保护学报Journal of Plant Protection ，2018 ，45 （4 ）：812-818 DOI ：10.13802/ki.zwbhxb.2018.2017017 大豆疫霉细胞凋亡相关基因的鉴定与表达分析 1 1 2 2 2 1* 陈琳琳 耿雪晶 王 雯 张 雄 窦道龙 李洪连 （1. 河南农业大学植物保护学院，小麦玉米作物学国家重点实验室，河南省粮食作物协同创新中心，郑州450002 ； 2. 南京农业大学植物保护学院，南京210095 ） 摘要：为探讨大豆疫霉Phytophthora sojae 细胞凋亡潜在的调控机制，根据已知的细胞凋亡蛋白，利 用在线工具BLASTP 、pFAM 和SMART 在大豆疫霉蛋白组数据库中鉴定细胞凋亡同源蛋白并构建 其进化树，通过转录组数据和实时荧光定量PCR 技术分析细胞凋亡相关基因在大豆疫霉生长、发 育及侵染不同时期的表达情况。结果显示：在大豆疫霉中共鉴定到13 个细胞凋亡同源蛋白，包括 核酸内切酶G （PsNUC 1）、细胞色素c （PsCYCS ）、凋亡诱导因子（PsAIF ）、丝氨酸蛋白酶（PsHtrA- 1、 PsHtrA-2 和PsHtrA-3）、多聚ADP 核糖聚合酶（PsPARP- 1、PsPARP-2 和PsPARP-3）和TatD 核酸酶 （PsTatD 1、PsTatD2、PsTatD3和PsTatD4）。在进化上，PsNUC 1、PsCYCS、PsAIF、PsHtrA- 1、PsPARP- 1、 PsPARP-2 、PsPARP-3、PsTatD 1和PsTatD2 与人及秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans 的同源蛋白 亲缘关系较近，而与真菌相关蛋白亲缘关系较远，PsHtrA-2 、PsHtrA-3、PsTatD3 和PsTatD4 与酿酒酵 母Saccharomyces cerevisiae 相关蛋白相似度更高，说明大豆疫霉细胞凋亡蛋白在进化中发生了较大 变异。大豆疫霉细胞凋亡相关基因PsHtrA-1 和PsRARP - 1 在孢子囊阶段诱导表达，PsHtrA- 2 和 PsRARP-2 在游动孢子阶段上调表达，PsAIF 、PsHtrA-3、PsRARP- 1 和PsRARP-2 在侵染阶段明显诱 导表达，PsCYCS 在侵染阶段下调表达。细胞凋亡相关基因在大豆疫霉不同阶段的表达模式有较 大差异，说明细胞凋亡在大豆疫霉生长、发育及致病过程中具有重要作用。 关键词：大豆疫霉；细胞凋亡；基因鉴定；表达分析 Identification and expression analysis of apoptosis-related genes in soybean stem and root rot pathogen Phytophthora sojae Chen Linlin1 Geng Xuejing1 Wang Wen2 Zhang Xiong2 Dou Daolong2 Li Honglian1* （1. Collaborative Innovation Center of Henan Grain Crops, National Key Laboratory of Wheat and Maize Crop Sciences, College of Plant Protection, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, Henan Province, China; 2. College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu Province, China） Abstract: To investigate the possible mechanisms of apoptosis in soybean ste