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播娘蒿原生质体培养研究-西华师范大学学报自然科学版
DOI :10.16246/j.issn.1673 -5072.2001.03.004
22 3 ( ) 2001 9
Vol.22 No.3 Journal of Sichuan Teachers Colle e (Natural Science) Sep.2001
:1001-8220 (2001)03-0225-05
周颂东
(, 637002)
6
:, (1 ～ 1.5)×10 .
.:4 %+2 %+0.5 %;
4
20×10 /mL; 10 %+2 %.:1 ～7d
, 20 %, 18 d , .
:;;
:Q945.39;S336 :A
, DNA,,
, .
, .(Cruciferac), Kartha[1]
(Brassic napus ),
[2-5] .,(Descurainia sop hia ).
[6]
, .
, .
、.
1 材料和方法
1.1
.,
.
1.2
1.2.1 无菌苗的获得
70 %1 min,, 0.1 %H Cl 6 ～8 min,
2
5 ,30 /L 6 /L MS ,25 ℃,7 ～10 d
.
1.2.2 原生质体制备
(1) (Cellulase Onozuka, R-10)、(Pectinase)、
(Macerozyme,R-10)0.1 %MES (2-morpholino ethanesulfonic acid ), ,
0.45 μm .:27.9 m KH PO , 101 m KNO , 1 480 m CaCl ·2H O,
2 4 3 2 2
:2001-0 1-12
:
:(1972-), , , , , 、.
() 2001
226
246 m M SO ·7H O,0.166 m KI,0.025 m CuSO ·5H O (CPW ),10 %, pH 5.6 ～5.8.
4 2 4 2
(2) , 50 mL ,
5 mL ,(45 r/min),
,50 μm , 500 r/min 5 min, , (CPW-10M)
2 ,1 ～2 .
1.2.3 原生质体培养
4
(2.5 ～20)×10 /mL,2 mL
6 cm , 25 ℃.10 ～30 d , 10 d
0.2 ～0.4mL ..30 d ,
,,.
:MS+6-BA 0.5m /L+NAA 0.1m /L+2,4-D 1.0m /L+100 m /L+
800 m /L 、、.
:MS+6-BA 0.5 m /L+NAA 0.1 m /L+2, 4-D 0.5 m /L+100 m /L+
800 m /L+30 /L .
:MS+6-BA 0.5 m /L+NAA 0 .1 m /L+2,4-D 0.5m /L+30 /L +7 /L .
pH 5.6 ～5.8, 0.22 μm ,
.
2 结果与分析
2.1
,
.,
..
1 , 、.Ⅰ24 h
4 4
10 /FW,36 h, 10 / FW .Ⅰ-Ⅳ,
,, , .Ⅴ, Ⅵ, Ⅶ
,,,
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