基因芯片技术鉴定棉铃虫胁迫后棉花差异表达基因Screeningand.PDF

农业生物技术学报，  年， 第  卷， 第  期， 第  页  2011 19 5 908~915 JournalofAgriculturalBiotechnology,2011,Vol.19,No.5,908~915  研究报告  ALetter  基因芯片技术鉴定棉铃虫胁迫后棉花差异表达基因 1,2  2  1,2  1  2*  2  武娟  齐放军  田文华  韩榕  张永军  郭予元  1 041004 2 100193  山西师范大学生命科学学院， 临汾 ； 中国农业科学研究院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室， 北京 * yjzhang@ippcaas.cn  通讯作者，  摘 要 棉花在受到植食性昆虫为害后基因表达会发生变化，筛选鉴定这些调控基因有助于解析昆虫诱导 棉花抗虫性的分子机制。本研究以棉花 Gossyp ium  中  为实验材料， 分别从正常生长条件下的棉花  ( spp.)( 12) (对照 和棉铃虫 He licoverp a armigera 俟 取食胁迫  、  、  和  的棉花叶片 处理 中提取总  ， 采 ) ( H bner) 6 12 24  48h  ( ) RNA 用 Affymetrix棉花基因芯片进行了基因表达谱分析。结果表明， 棉铃虫取食 6h 时， 差异表达基因共有 4 109  个 占  ， 其中上调  个， 下调  个； 棉铃虫取食  时， 差异表达基因共有  个 占  ， 其 ( 28%) 1917  2 192  12h  2 605  ( 18%) 中上调  个， 下调  个； 棉铃虫取食  时， 差异表达基因共有  个 占  ， 其中上调  1326  1279  24h  3213  ( 22%) 1424  个， 下调  个； 棉铃虫取食  时， 差异表达基因共有  个 占  ， 其中上调  个， 下调  1789  48 h  2 763  ( 19%) 1450  1313  个。 进行生物信息学分析后发现， 这些基因功能涉及氧化应激响应、 防御响应、 信号转导、 转录调控、 黄酮类生 物合成、 萜类化合物合成与代谢以及源于多种氨基酸的罗勒生物碱生物合成等多个方面。另外， 从芯片结果 中鉴定获得调控棉花特异性挥发物的相关基因， 发现法呢基焦磷酸合酶基因的表达量受昼夜节律的影响， 同 时， 棉铃虫取食棉花诱导杜松萜烯合酶基因表达量上调。实时荧光定量 PCR 检测发现， 棉铃虫取食 6h 的棉 株中法呢基焦磷酸合酶基因和查尔酮异构酶基因表达量较高， 而在被棉铃虫取食 48h 的棉株中这两个基因 的表达量较低。 研究结果为棉花受棉铃虫为害后产生的防御机制的研究提供了基础资料， 进一步为植食性昆 虫取食