米根霉脂肪酶的制备及其在餐厨废弃油脂转化中的应用-中山大学学报.PDFVIP

第５５卷　第２期 中山大学学报 （自然科学版） Ｖｏｌ５５　Ｎｏ２ 　 ２０１６年　３月 ＡＣＴＡ　ＳＣＩＥＮＴＩＡＲＵＭ　ＮＡＴＵＲＡＬＩＵＭ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＡＴＩＳ　ＳＵＮＹＡＴＳＥＮＩ Ｍａｒ　２０１６　 ＤＯＩ：１０１３４７１／ｊｃｎｋｉａｃｔａｓｎｕｓ２０１６０２０２０ 米根霉脂肪酶的制备及其在餐厨 废弃油脂转化中的应用 姜苏峻，林蒋海，吕晓静，肖文娟，龚映雪，刘泽寰 （暨南大学生命科学技术学院，广东广州５１０６３２） 摘　要：利用脂肪酶把餐厨废弃油脂转化成为生物柴油能够达到绿色化、资源化处理餐厨垃圾的目的。从米根 霉ＣＩＣＣ３００５ｃＤＮＡ文库扩增得到脂肪酶基因 （ｐｒｏＲＯＬ），并克隆到毕赤酵母组成型表达载体ｐＧＡＰＺＡ中，电转 α 入毕赤酵母Ｘ－３３中构建重组毕赤酵母，ＳＤＳＰＡＧＥ电泳发酵液上清，结果显示重组酶的相对分子质量约为 ３５０００。以橄榄油为底物测得脂肪酶活性为 （４２６６±０８）Ｕ／ｍＬ。利用重组的米根霉脂肪酶对餐厨废弃油脂进 行转酯化反应，以乙醇为酰基受体制备脂肪酸乙酯，在水含量为５％，醇油摩尔比为４∶１，酶添加量为１０％的条 件下得到脂肪酸乙酯的最高得率为４９％。 关键词：餐厨废弃物；生物柴油；米根霉；脂肪酶；毕赤酵母 中图分类号：Ｑ８１５　　文献标志码：Ａ　　文章编号：０５２９－６５７９（２０１６）０２－０１１１－０６ Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａｅｌｉｐａｓｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎ ｔｈｅｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｏｆｗａｓｔｅｃｏｏｋｉｎｇｏｉｌ ＪＩＡＮＧＳｕｊｕｎ，ＬＩＮＪｉａｎｇｈａｉ，ＬＶＸｉａｏｊｉｎｇ，ＸＩＡＯＷｅｎｊｕａｎ，ＧＯＮＧＹｉｎｇｘｕｅ，ＬＩＵＺｅｈｕａｎ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＪｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇｌｉｐａｓｅｔｏｃｈａｎｇｅｗａｓｔｅｃｏｏｋｉｎｇｏｉｌｉｎｔｏｂｉｏｄｉｅｓｅｌｃａｎａｃｈｉｅｖｅｔｈｅｇｏａｌｏｆｇｒｅｅｎ，ｒｅｃｙ ｃｌｉｎｇｏｆｆｏｏｄｗａｓｔｅ．ＡｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇＲｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａｅｌｉｐａｓｅｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｒｏｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＰｒｏＲＯＬ）ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏｔｈｅｐＧＡＰＺＡａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄｉｎｔｏｔｈｅＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＸ３３ｓｔｒａｉｎ．Ｔｈｅｌｉｐａｓｅｗａｓ α ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄａｎｄｓｅｃｒｅｔｅｄｗｉｔｈａｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｏｆ３５０００．Ｔｈｅｌｉｐａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓ（４２６６± ０８）Ｕ／ｍＬｗｈｅｎｕｓｉｎｇｏｌｉｖｅｏｉｌａｓｓｕｂｓｔｒａｃｔ．Ｕｓｉｎｇｗａｓｔｅｃｏｏｋｉｎｇｏｉｌａｓｔｈｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌａｎｄａｌｃｏｈｏｌａｓ ａｃｙｌｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｌｉｐａｓｅａｓｃａｔａｌｙｓｔｆｏｒｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，４９％ｏｆｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓ ｔｅｒｙｉｅｌｄｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｗｈｅｎｔｈｅｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔｉｓ５％，ｔｈｅａｌｃｏｈｏｌｏｉｌｍｏｌａｒｒａｔｉｏｉｓ４∶１，ａｎｄｌｉｐａｓｅａｄｄｉｎｇ ａｍｏｕｎｔｉｓ１０％，ｕｎｄｅｒｔｈｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｔｈｅｆａｔｔｙａｃｉｄｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒｙｉｅｌｄｉｓ４９％． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆｏｏｄｗａｓｔｅ；ｂｉｏｄｉｅｓｅｌ；Ｒｈｉｚｏｐｕｓｏｒｙｚａｅ；ｌｉｐａｓｅ；Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ