烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化-江西农业大学学报.PDFVIP

－ 江西农业大学学报　 ２０１７，３９（１）：２８ ３６ ｈｔｔｐ：／ ／ ｘｕｅｂａｏ．ｊｘａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓＪｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ ＤＯＩ：１０．１３８３６／ ｊ．ｊｊａｕ．２０１７００４ － 谢丽娟，陶瑶，钟思荣，等．烟草ａｔｐ９基因ＲＮＡｉ表达载体的构建及遗传转化［Ｊ］．江西农业大学学报，２０１７，３９（１）：２８ ３６． 烟草ａｔｐ９基因ＲＮＡｉ表达载体的 构建及遗传转化 １，２ １ １ １ １ 谢丽娟 ，陶　 瑶 ，钟思荣 ，吴凌敏 ，聂亚平 ， ３ １ ４ １∗ 周　 玮 ，刘　 栋 ，王建革 ，刘齐元 （１．江西农业大学 农学院／ 作物生理生态与遗传育种教育部重点实验室／ 江西省作物生理生态与遗传育种重点实验 室，江西 南昌 ３３００４５；２．南昌职业学院，江西 南昌 ３３００４５；３．湖南农业大学 生物安全科学技术学院／ 植物病虫害生物 学与防控湖南省重点试验室，湖南 长沙 ４１０１２８；４．江西农业大学 园林与艺术学院，江西 南昌 ３３００４５） 摘要：ａｔｐ９基因是烟草的雄性不育相关基因。 为研究ａｔｐ９基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用，根 据ａｔｐ９基因全长序列，设计特异性引物，扩增正、反义干扰片段，将长度为２３９ｂｐ 的ａｔｐ９基因的正、反向干扰片 段分别连接到ｌｉｎｋｅｒ片段的两侧，最后插入到植物表达载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１中，成功地构建了ａｔｐ９基因的ＲＮＡｉ 表达载体。 利用农杆菌介导法将其转化烟草保持系品种中烟９０，结果证明ａｔｐ９基因的ＲＮＡｉ表达载体已整合 － － 到中烟９０基因组中。 经抗性筛选以及分子检测最终获得４１株转ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１ ａｔｐ９ ＲＮＡｉ烟草植株，其中阳 性烟草有２０株，转化率为４８．８％。 研究结果为下一步验证ａｔｐ９基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用 奠定了基础。 关键词：烟草；ａｔｐ９基因；ＲＮＡｉ；表达载体构建；遗传转化 － － － 中图分类号：Ｓ５７２．０３２　 　 文献标志码：Ａ　 　 文章编号：１０００ ２２８６（２０１７）０１ ００２８ ０９ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｔｐ９ Ｇｅｎｅ ＲＮＡ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒ ｏｆ Ｔｏｂａｃｃｏ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ １，２ １ １ １ １ ＸＩＥ Ｌｉ⁃ｊｕａｎ ，ＴＡＯ Ｙａｏ ，ＺＨＯＮＧ Ｓｉ⁃ｒｏｎｇ ，ＷＵ Ｌｉｎｇ⁃ｍｉｎ ，ＮＩＥ Ｙａ⁃ｐｉｎｇ ， ３ １ ４ １∗ ＺＨＯＵ Ｗｅｉ ，ＬＩＵ Ｄｏｎｇ ，ＷＡＮＧＪｉａｎ⁃ｇｅ ，ＬＩＵ Ｑｉ⁃ｙｕａｎ （１．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ ＣｒｏｐＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＢｒｅｅｄ