碱基序列互补的DNA.PPT

第十四章 核酸的生物合成 二、思考题 1、区分下列各对术语：　　a) DNA聚合酶I/DNA聚合酶III　　b) 前导链/后随链　　c) 切除修复/直接修复　　d) 5-3外切酶/3-5外切酶　　e) DNA解旋酶/DNA连接酶　　f) 正链病毒/负链病毒 2、简述Meselson－Stahl的实验，并解释其如何证明了DNA是半保留复制的3、有哪些因素可以导致DNA的损伤，机体通过什么机制对其进行修复？4、简述真核生物进行不连续DNA复制时，在复制叉处发生的一系列步骤。5、在E.coli中进行DNA复制至少需要哪些蛋白？每个蛋白的功能是什么？ 本章主要内容 DNA的生物合成 RNA的生物合成 蛋白质的生物合成 第一节 DNA的生物合成(复制) DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代； 通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。 反中心法则 在RNA病毒中，其遗传信息贮存在RNA分子中。 这类生物体，遗传信息的流向是RNA通过复制，将遗传信息由亲代传递给子代，反转录将遗传信息传递给DNA，再由DNA通过转录和翻译传递给蛋白质，这种遗传信息的流向就称为反中心法则。 一、复制（replication） （一）半保留复制 （二）DNA复制的起始点、方向和方式 1. 起始点 是含有100-200个碱基的一段DNA。 复制叉 DNA的两条链在起始点分开形成叉子样 的“复制叉” （replication fork），也叫 “生长点” （growing point）, 随着复制叉的移动完成DNA的复制过程。 细胞内存在能识别起始点的特种蛋白质。 2. 方向 DNA复制朝一个方向（单向复制，unidirectional）， 两个相反方向进行（双向复制，bidirectional，主要） 真核生物染色体: 是多复制子的复制。 复制子是能够独立完成复制的功能单位。 复制子(replicon)两个相邻复制原点间的距离。 半不连续复制 （三）、参与DNA复制的主要酶类 1. 解旋、解链酶类 解链酶 DNA拓扑异构酶 单链结合蛋白（SSB） 2. 引物酶 3. DNA聚合酶 4. DNA连接酶 2） DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase) 拓扑异构酶Ⅰ（转环酶）：剪断并再连接负超螺旋DNA一条链，不需要能量。 3）单链DNA结合蛋白 (single-stranded DNA-binding protein SSB） 作用：稳定单链DNA，防止碱基重新结对； 保护单链DNA，避免核酸酶对其水解。 2、引物酶(primase)本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP） 原核DNA聚合酶 DNA聚合酶： 链延长（聚合）反应 复制的准确性不高：会改变生物的遗传性能， 易引起突变或致死。 若转录和翻译的失误：一般只涉及细胞中某种RNA或蛋白质的产生，不会改变生物的遗传性能 因此，DNA聚合酶的校正作用是保证复制准确性的数种途径之一。 （四）、DNA的复制过程 识别复制起始点 解螺旋 SSB蛋白固定 引物合成 DNA合成 去除引物 DNA连接 (1)复制的起始 复制从特定的位置(复制原点Ori)开始，该位置常是富含A、T区段。 (2)、复制的终止 在复制过程中形成的RNA引物，需由RNA酶来水解去除； RNA引物水解后遗留的缺口，由DNA聚合酶Ⅰ（原核生物）或DNA聚合酶?（真核生物）催化延长缺口处的DNA，直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。 两条子链分别与两条亲链重新形成双螺旋结构， 生成两个与亲代DNA完全相同的子代DNA。 真核生物的DNA复制（ DNA指导下的DNA合成）  与原核细胞DNA复制基本相似，不同之处： 复制有多个起始点，是由多“复制子”共同完成。 DNA聚合酶至少有5种以上，命名为α、β、γ、δ和ε 端粒的复制： 线性染色体的末端DNA称为端粒（telomere）。 端粒的复制是由一种特殊的酶------端粒酶所催化 二、反转录作用（ RNA指导下的DNA合成） 1970年Temin和Baltimore同时从肉瘤病毒中发现发现“反转录酶”,此酶催化RNA合成DNA，合成方向5?3’， 即RNA指导下的DNA聚合酶; 此酶催化遗传信息从RNA流向DNA,与转录作用正好相反; 此酶以dCTP、dGTP、dATP、dTTP为底物,催化生成与病毒RNA（模板）碱基序列互补的DNA。 作