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检测氟喹诺酮类药物残留方法对比和分析 　　摘 要：氟喹诺酮类药物是一类广谱抗菌药物，在兽医临床和水产养殖中大量使用，产生了一定量的药物残留，鉴于其对人类健康和环境的影响，作者详细的对比分析了氟喹诺酮类药物残留检测方法包括微生物法（MIA）、色谱法、色谱-质谱联用法、高效毛细管电泳法和免疫学检测方法等，并提出了目前合理的检测方法，希望对今后检测氟喹诺酮类药物残留提供帮助。 　　关键词：检测；动物组织；氟喹诺酮类；对比与分析 　　中图分类号：TQ450.263 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20151132003 　　随着社会工业化的发展，环境致病因素，如大气、水和食品污染，对人们健康的影响日益显著，而食品的化学污染一直受到广泛关注。目前已知的外源性化学物质达500万种以上，其中至少6万种已经进入人们的生产和生活，如医药、农药、化妆品、生物毒素和各种工业原料等。这些化学物质通过食品原材料的生产、加工、烹饪、包装、贮存和运输等环节进入食品引起食品污染。食品污染对机体的损害一般呈慢性的蓄积过程，危害性质严重、范围广影响深远。 　　兽药残留指给动物使用药物后蓄积或贮存在细胞、组织或器官内的药物原形、代谢产物和药物杂质。由于兽药残留与公众的健康息息相关，所以其已经成为一个影响广泛和颇具争议的问题。 　　氟喹诺酮类药物，亦称为6-氟喹诺酮类（fluoroquinolones，FQs），是一类十分重要的广谱抗生素，是第三代喹诺酮类药物（QNs）。目前国内外已批准用于动物的FQs 包括诺氟沙星（又称氟哌酸，即norfloxacin，NOR）、恩诺沙星（enrofloxacin ，ENR）、沙拉沙星（sarafloxacin，SAR）、单诺沙星（danofloxacin，DAN）、环丙沙星（ciprofloxacin，CIP或CIF）、双氟沙星（difloxacin，DIF）、氧氟沙星（ofloxacin，OFL）和麻保沙星（marbofloxacin，MAR）等[1]。FQs系化学合成药物，价格低廉，故在医学和兽医学中得到广泛的应用。但由于致病菌产生耐药性和某些FQs的潜在致癌性质，其残留问题已经引起了广泛关注。本文就FQs残留及分析方法作一对比分析。 　　1 氟喹诺酮类药物的残留 　　FQs类抗菌药是人兽共用药，动物体内的药物残留通过食物链进入人体，对人体健康直接产生危害，可以导致细菌耐药性产生，并有潜在致癌的危险。因此，世界各国对FQs类抗菌药在动物源性食品中的残留制定了最高残留限量标准（maximum residue limits，简缩MRLs）（10-1900ug/Kg）。世界卫生组织也对FQs的残留做出限量推荐值，其中恩诺沙星限量是40 ug/Kg，欧盟规定各种组织中ENR的MRLs为30 ug/Kg（标准残留物：ENR+CIP），粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会（Joint FAO/WHO Expert Committeeon Food Additives，缩写JECFA）推荐鸡肝组织SAR的MRL为80 ug/Kg，猪肝组织中DAN的MRL为50 ug/Kg。氟喹诺酮类药物的残留危害早在1997年，美国已经严格限定了FQs的使用剂量和使用范围，其法律禁止在使用动物中使用FQs。新西兰和澳大利亚的相关法律规则要求食品中不得检出FQs。目前在加拿大，只有恩诺沙星和达氟沙星被允许用于临床上治疗牛呼吸道相关疾病，其限量标准为肾脏0.4 ug/g，肌肉0.02 ug/g。目前我国农业部仅规定了达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星在不同动物性食品中的最高残留限量。 　　2 氟喹诺酮类药物残留检测方法[3、4、6] 　　目前用于FQs残留的检测方法主要有微生物法（microbiological assays，简缩MIA）、色谱法（chromatography）、色谱-质谱联用法、高效毛细管电泳法和免疫学检测方法等。 　　2.1 微生物法 　　借助抗菌药物的抗微生物流动性，在特定的介质中与已知微生物接种，经过一定阶段的培养，依据培养微生物的生长状况，进而对抗菌药物进行评价，这一方法称为微生物法。该方法主要检测组织抗生素其优点是成本较低，且操作简单，无需精密昂贵的仪器。但也存在缺点，即对FQs药物的检测不敏感和有选择性。 　　2.2 色谱法[2] 　　色谱法或称层析法是一种物理或物理化学的分离分析方法。该法是利用被分离组分在流动相和固定相中的分配系数差异，使不同组分在其中的差速迁移快慢不同而达到分离的目的。色谱法包括气相色谱法（GC）、液相色谱法（LC）和超临界流体色谱法（SFC），检测FQs药物残留常用的色谱法及优缺点详见下表。 　　2.3 色/质联用分析法[5] 　　色/