藏红花愈伤组织诱导和褐化抑制-南京工业大学学报自然科学版.PDFVIP

第３１卷第６期 南　京　工　业　大　学　学　报　（自然 科 学 版） Ｖｏｌ．３１Ｎｏ．６ ２００９年１１月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＮＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｎｏｖ．２００９ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－７６２７．２００９．０６．００５ 藏红花愈伤组织诱导和褐化抑制 袁丽红，陆玉婷，黄　晶 （南京工业大学 生物与制药工程学院，江苏 南京 ２１０００９） 摘　要：对藏红花的球茎、无菌芽和幼叶的愈伤组织诱导条件进行研究，同时探讨愈伤组织诱导过程中的褐化和污 染问题．结果表明：与球茎相比，以无菌芽和幼叶为外植体，愈伤组织诱导率较高，诱导时间较短，但形成的愈伤组 织易褐化．较大球茎（ ２０ｇ）也是藏红花愈伤组织诱导较好的外植体，愈伤组织诱导速度随球茎储藏时间的增加 ≥ 而升高．含有２０ｍｇ／Ｌ２，４二氯苯氧乙酸（２，４ Ｄ）和０５ｍｇ／Ｌ６苄氨基嘌呤（６ ＢＡ）的ＭＳ（ＭｕｒａｓｈｉｇｅａｎｄＳｋ ｏｏｇ）培养基有利于球茎愈伤组织的诱导，３０ｄ愈伤组织诱导率可达７０％以上．在愈伤组织诱导过程中，连续转接外 植体至新鲜培养基可以有效降低褐化率，而在培养基中添加活性炭（ＡＣ）和聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）不能有效抑制 褐化．表面灭菌前采用流水冲洗过夜可有效减少球茎表面附生菌，明显降低污染率． 关键词：藏红花；球茎；愈伤组织；诱导；褐化 中图分类号：Ｏ６１１６２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１６７１－７６２７（２００９）０６－００２１－０６ ＣａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＣｒｏｃｕｓｓａｔｉｖｕｓＬ． ＹＵＡＮＬｉｈｏｎｇ，ＬＵＹｕｔｉｎｇ，ＨＵＡＮＧＪｉｎｇ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｃｏｒｍｓ，ｓｔｅｒｉｌｅｂｕｄｓａｎｄｙｏｕｎｇｌｅａｖｅｓｏｆＣｒｏｃｕｓｓａｔｉｖｕｓＬ．ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ， ａｎｄｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇａｎｄｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗｅｒｅａｌｓｏｅｘｐｌｏｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔ ｗｉｔｈｔｈｅｓｔｅｒｉｌｅｂｕｄｓａｎｄｙｏｕｎｇｌｅａｖｅｓａｓｅｘｐｌａｎｔｓ，ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｅｍｅｎｔｗａｓｈｉｇｈｅｒａｎｄ ｔｈｅｉｎｄｕｃｉｎｇｔｉｍｅｗａｓｓｈｏｒｔｅｒｔｈａｎｔｈａｔｗｉｔｈｃｏｒｍｓａｓｅｘｐｌａｎｔｓ，ｂｕｔｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｔｏｏｋｐｌａｃｅｅａｓｉｌｙｉｎｃａｌ ｌｕｓ．Ｔｈｅｂｉｇｇｅｒｃｏｒｍｓ（ ２０ｇ）ｗｅｒｅｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｌｏｎｇｅｒｃｏｒｍｓｗｅｒｅ ≥ ｓｔｏｒｅｄ，ａｎｄｔｈｅｆａｓｔｅｒｃａｌｌｉｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄ．Ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｅｍｅｎｔｗａｓｏｖｅｒ７０％ｗｉｔｈｉｎ３０ｄ ｂｙｕｓｉｎｇＭｕｒａｓｈｉｇｅａｎｄＳｋｏｏｇ（ＭＳ）ｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ２０ｍｇ／Ｌ２，４Ｄａｎｄ０５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ． Ｉｎｏｃｕｌａｔｉｎｇｅｘｐｌａｎｔｓｔｏｆｒｅｓｈｍｅｄｉａｉｎｓｕｃｃｅｓｓｉｏｎｃｏｕｌｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇ，ｗｈｅｒｅａｓｍｅｄｉａ ｗｉｔｈｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｖａｔｅｄｃａｒｂｏｎａｎｄｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅｗｅｒｅｉｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｔｏｄｉｍｉｎｉｓｈｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇ． Ｗａｓｈｉｎｇｃｏｒｍｓｗｉｔｈｒｕｎｎｉｎｇｔａｐｗａｔｅｒｏｖｅｒｎｉｇｈｔｂｅ