金标试纸法和ELISA法检测血清标本HBsAg对比分析.docVIP

金标试纸法和ELISA法检测血清标本HBsAg对比分析 　　【摘要】目的 探讨金标试纸法和ELISA法对于血清标本检测的效果，分析比较其不同之处，进而找出改进的措施。方法 对无偿献血的人的血液标本用两种不同的方法进行HBsAg的快速检测，在用对金标法来检测HBsAg之后，将其血液标本保留样本，而采用ELISA试剂来进行HBsAg的检测时，需要采用两种不同的方法进行两次测定。结果 在18576份血液样品中，用金标试纸法检测出了阳性1013份，占应检人数的5.45%，而使用ELISA法检测出了阳性1125份，占应检人数的6.06%，经统计学分析，两种检测结果没有显著的差别。结论 金标试纸法检测的HBsAg的漏检率比较高，将其与ELISA检测法相结合会取得更好的效果。 　　【关键词】金标试纸法 ELISA法 HBsAg 　　中图分类号：R 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2012）3-310-02 　　 　　在我国，正常人群的乙肝表面抗原(即 HBsAg) 的携带者一般是10%-15%, 关于如何在流动的无偿献血的现场采血时能够快速得侦查筛选出乙肝表面抗原阳性者, 这个问题的解决对于更好地节省血液资源来说十分地重要。一般来说，对于无偿献血者在采血前采用金标试纸法可以大大地减少乙肝表面抗原阳性血的收集，降低采集来的血液报废率，还可以降低有关工作人员的交叉感染风险。但是，实验证明，金标试纸法和ELISA法这两种不同方法检测出来的结果不是很相符。所以，本次研究将这两种方法的实际检测结果进行了比较，现对其报告如下： 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 随机选取流动无偿献血站当日采集来的血液标本80份，血液中都加入了抗凝剂。金标试纸法中的金标试纸都源自于厦门的新创公司，而ELISA的试剂都源自于上海的科华生物公司。试剂都经过了卫生部门的批检，需要在有效期内使用，而各批次的试剂在用于日常的检测之前都进行了血清盘的检测。 　　1.2 方法 　　1.2.1 金标试纸法来检测HBsAg 首先，用试剂盒中留以备用的毛细吸管来吸取全血中的2~3滴，使它滴到试纸加样的一端，此时血清能够自动地通过滤膜而向检测的一端移动，然后需要在适宜的温度下（比如25度）后的10~ 15分钟内判读结果是呈阳性还是阴性。这种方法是因为首先已经在玻璃纤维膜上包被了金标抗-HBs单抗，而硝酸纤维素的膜上的检测线以及其对照线上都分别地包被好了抗-HBs单抗与羊抗鼠IgG。在检测的时候, 采集来的标本血清中的HBsAg可以和胶体金一抗体相互结合形成一种复合物，再由层析作用, 可以使得复合物能够沿着纸条不断地向前移动，如果是阳性的标本,那么就会和检测线上已经包被的抗体相互结合形成一种夹心物从而凝聚显色[1]。 　　1.2.2 ELISA法来检测HBsAg 此种方法需要在实验室内( 即标准的条件下)按照试剂的说明书来按程序操作。这种方法的原理是特异性的抗体能够吸附到固相的载体表面上去，和血液样品中的抗原相互结合形成一种抗原抗体的复合物, 并且能和后来加进去的已用酶标记好了的抗体进行二次结合,从而形成双抗体类型的夹心, 并且利用酶活性能够催化的作用和适当的底物进行化学上的反应, 进而生成一些有色的物质, 通常来说，在一定的范围内，有色物质生成量是和待测样品中抗原量形成正比的。 　　1.3 检测结果的判断 在金标试纸法中，靠近加样端并且包被了抗-HBs的一端是检测线，那另外一端即为对照线。如果纸条在检测线与对照线的位置上同时出现了两条紫红色的线那就是呈阳性，如果只在对照线的位置上出现了一条紫红色的线那就呈阴性，如果两条线均不出现颜色那就视为失效。在ELISA法中，如果S/CO的值大于或者等于1，那就证明结果呈阳性。 　　2 结果 　　2.1 两种检测方法的结果比较 　　2.2 金标试纸法检测出的1013份阳性和ELISA法检测出的阳性基本上相符合，此外，ELISA法检测出的112份阳性的标本是金标试纸法漏检的，占阳性标本的10%，占应检标本的0.6%。 　　2.3 这两种检测方法的阳性相符率是90%( 1013/1125)，阴性相符率是100%( 17563/17451)、漏检率是0.6%( 112/ 18576)、假阴性率是10%( 112/1125)、总的符合率是99%( 18464/18576)。因为P＞0.05，所以没有显著性的差异。 　　3 讨论 　　据报道称，在我国，自然人群中的乙肝表面抗原的阳性率约为8.74%，而血液中的乙肝表面抗原到现在为止依然是HBV感染的一个重要标记。伴随着医学的不断发展，在临床诊疗中各种检查与治疗的仪器，比如胃镜、纤维喉镜、纤维支气管镜等等被广泛使用，所以会有乙肝交叉感染的风险。为了减少医源性的乙