高通量核酸分析技术在体外诊断领域应用前景.PDFVIP

MedicalJournal 广东医学2010年2月第3l卷第3期Ouangdong ·276· 高通量核酸分析技术在体外诊断领域的应用前景 张朋军，田亚平△ 中国人民解放军总医院生化科(北京100853) 分子诊断技术是以目的核酸作为诊断目标，通过核酸扩 高通量、高灵敏度和重复性等优点。另外液态基因芯片还可 增技术或者核酸杂交技术检测核酸的变化，并以此作为疾病 根据I临床情况进行多种不同组合HPV型别的检测，不仅成 诊断的依据。相对于传统的检测方法如显微镜技术或微生 本低，而且比固态芯片更具有灵活性。谢明水等口1利用多肿 物培养，核酸分析技术的优越性在于其高灵敏度和特异性， 瘤标志物液态芯片技术分析121例恶性肿瘤患者、42例良 核酸分析技术不仅在疾病诊断方面具有优势，而且在疾病的 性疾病患者、39例正常对照者血清中9种常见肿瘤标志物 易感性．疾病的分型、分期以及预后判断和疗效检测都具有 的水平，发现该方法对恶性肿瘤的检测有较好的灵敏度和特 十分重要的意义。目前核酸检测技术已广泛应用于科学研 异性。对肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌和前列 究和临床检测，如感染性疾病和遗传性疾病筛查、肿瘤的分 腺癌等常见肿瘤进行9项指标联合检测的阳性率均高于单 子诊断和药物基因组研究等，是临床检验医学的一个重要组 一标志物的检测，可以作为高危人群的早期肿瘤筛查手段之 成部分。随着核酸分析技术的不断进步，人们期望能够一次 一。随着液态芯片肿瘤标志物检测试剂进入市场，并逐渐应 针对大量基因进行检测，高速且低成本的高通量核酸检测技 用于11名,／g．检验，其强大的检测能力和高质量的检测数据已经 术已成为当今核酸检测的主流，并逐渐向超高通量方向发 引起了国内临床检验界的广泛认可。 展。高通量核酸分析技术的应用为感染性疾病和遗传性疾 2 GeXP技术 病筛查、肿瘤的分子诊断和药物基因组研究领域提供了新的 GeXP技术是C,enomeLabGeXP分析系统针对基因表达 技术平台。 分析、药物作用分析以及基因调控的技术。是一种全新的基 l 液态芯片 因表达谱定量分析平台，一次可以同时对30重的RT—PCR 液态芯片是20世纪70年代美国Luminex公司研制出 GeXP系统可同时对 反应产物进行定量，升级的GenomeLab 的新一代生物芯片，其利用带编码的微球体作为载体，流式 数百个样品分析多达数百个基因。其基本原理为将多重 细胞术作为检测平台，对核酸以及蛋白质等进行高通量测 PCR技术和毛细管电泳技术相结合，采用通用引物和特异引 定。其主要原理是用聚乙烯微球组成的均匀溶液作为栽体， 物相结合的方法，由于通用引物的存在反应体系中各模板 一方面是载体表面上已经标记了荧光素和配体，例如抗原、 DNA的扩增效率一致从而实现多重PCR产物定量检测的目 抗体或核酸分子片段，当与待检样品混合后，可特异结合相 的J。GeXP技术是芯片和PCR技术的换代产品，其起始 应的受体，然后利用竞争抑制或标记二抗方法，达到定量检 RNA用量可以低至20 ng，并且可以在单一RT—PCR反应中 测标志物的目的。它可以是各种特异蛋白或抗体做成的液 同时检测至少25个基因的转录水平，提供了一种高敏感性、 态蛋白芯片，也可以连接特异核酸探针制备成的液态基因芯 高灵活性和高重复性的基因定量表达分析平台。董矜等HJ 片。总称为液态芯片。由于