《苯磺酸氨氯平对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶的影.docVIP

《苯磺酸氨氯地平对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶的影响》可行性报告 立项的背景及意义 苯磺酸氨氯地平为一线降压药，可用于治疗各种类型高血压（单独或与其他药物合并使用）和心绞痛，同时对肾脏有一定的保护作用。但是临床上经常可见同样的高血压患者服用氨氯地平却产生不同的反应：有的表现出高度敏感性，有的却表现为耐受性。导致这种个体差异的重要原因是细胞色素P450 (cytochrome P450，CYP450)的遗传多态性。[1] CYP450，主要存在于肝细胞内，参与药物代谢的主要CYP依次是CYP1、CYP2、CYP3家族中的亚型，如CYP1A2，CYP2A6，CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1，CYP3A4等。[2、3]不同的P450同工酶代谢不同的药物。 药物经P450酶代谢后，有的活性增强，有的活性减弱；但同时也会对其他的代谢酶产生诱导或抑制作用，而影响到其他药物的代谢。例如，酮康唑是CYP3A的强效抑制药，而特非那定主要由CYP3A代谢，两者联用时，酮康唑可明显抑制特非那定的代谢，造成特非那定血药浓度明显升高，进而引起尖端扭转型室速。[4] 氨氯地平用于降压治疗需要长期服；而且在治疗过程中，为了更好的控制血压，还常常要联用其他的降压药。因而考察氨氯地平对药物代谢酶P450的作用就显得尤为重要。但是目前没有文献报道氨氯地平在体内代谢时是否对P450同工酶有影响。因此，我们设计本项实验，研究氨氯地平对P450同工酶产生的影响。通过实验我们能获悉受氨氯地平影响的P450同工酶，这将能为高血压患者的个体化用药提供依据。使高血压患者在服用氨氯地平降压时，能预知氨氯地平对体内P450同工酶的影响，而在联用其他药物时做到剂量上的增或减，实现个体化给药。 二、国内外研究现状和发展趋势 药物代谢酶即药酶，也称肝微粒体混合功能氧化酶，主要存在于肝细胞平滑肌内质网内，由血红素蛋白(P450)、黄素蛋白(NADPH2细胞色素C还原酶)及磷脂三部分组成，相对分子质量45000～55000.[3]P450酶系由Klingberg和Gorfinkle在1958年发现，近50年来药物代谢酶研究取得了很大进展。 苯磺酸氨氯地平 苯磺酸氨氯地平，商品名络活喜，属于二氢吡啶类钙拮抗剂，广泛用于高血压和心绞痛的治疗，临床上常和其他的药物联用治疗疾病。目前尚未见它对CYP450各型同工酶的影响的报道。大鼠含有与人类同源的CYP450，常作为研究CYP450酶的实验动物[5-9]。 CYP450同工酶 CYP450是一超基因家庭，编码500多种酶蛋白，人体内CYP450酶主要存在于肝脏和小肠中。[10]这类酶有许多同工酶，分为多个基因/亚基因家族，同一家族的酶具有相似的功能。[11]在人类中已发现39种活性CYP酶，其中CYP1、2、3酶家族参与外来物质的代谢：CYP1A2(占P450代谢药物的4％)，CYP2A6(2％)，CYP2C9(10％) ，CYP2C19(2％)，CYP2D6(30％)，CYP2E1(2％)，CYP3A4(50％)CYP2家族是最大的一个家族，并且占人类所有CYP酶的1/3，它有4个成员具有基因多态性： CYP2B6、2C、2C9、2D6。[12] P450同工酶分子生物学特征如下： CYP1亚族 1.1CYP1A1：CYP1A1在肝脏的表达水平极低，主要分布在肝外组织如肺、肾、胃肠道、皮肤、胎盘等，是多环芳香烃、前致癌物和毒物的主要代谢酶。7-乙氧基异噁唑脱乙基反应(ethoxyresorufin O-deethylation,EROD)是最常用的CYP1A1探针，但CYP1A2和1B1等也参与了该反应。 1.2CYP1A2：CYP1A2主要在肝脏表达，参与了诸多药物(如非那西丁、他克林、异搏定和华法林等)的代谢。咖啡因N3-去甲基代谢是常用的CYP1A2标志反应。在体外CYP1A2活性研究中，约55%文献都选用了非那西丁O-脱乙基反应(phenacetin O-deethylation, POD)。[13] CYP2亚族 2.1CYP2A6：CYP2A6仅占人类肝CYP4％，CYP2A6在尼古丁氧化代谢中起重要作用，并参与麻醉药氟烷的代谢和一系列前致癌物的活化。CYP2A6酶蛋白量与香豆素7-羟化代谢密切相关。 2.2CYP2B6：临床上许多常用药物都由CYP2B6代谢，如咪达唑仑、环磷酰胺和一些镇痛药。丁氨苯丙酮近年多地被用于CYP2B6的体外活性研究，浓度为500μmol·L-1时，CYP2B6是其最主要的代谢酶。[14] 2.3CYP2C9：CYP2C9是CYP2C家族中的主要成员，占肝微粒体CYP450总量的20%。许多物质均可以作为CYP2C9底物，如甲苯磺丁脲、华法林、苯妥英、非甾体类抗炎药、