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兰花组培快繁的研究进展 　　摘 要：文章综述了兰花组织培养快繁技术的研究进展，着重阐述了不同外植体、培养因素对类原球茎诱导、增殖和分化的影响，扼要介绍了兰花快繁存在的问题，并对未来兰花的研究与开发进行了初步的探讨。 　　关键词：兰花 组培 快繁 　　兰花是整个兰科植物（orchidaceac）的总称，主要分布于热带、亚热带地区。我国以西南、东南地区居多。兰花花型奇特，花色高洁、花香素雅，有“花中君子”之称，可盆栽，也可作为切花，深受各国人民喜爱，具有很高的观赏价值和商业价值。自然条件下，兰科植物生长周期长，无性繁殖困难。传统的分株繁殖方式繁殖系数低，而有性繁殖也存在胚发育不完全，无子叶和胚乳，萌发时间长，萌发率极低等不足，难以大量繁殖和生产。随着人们对兰花需求量日益增大，传统繁殖已无法满足市场需求。通过组织培养建立无性繁殖体系进行繁殖，具有繁殖系数高，速度快、不受季节限制、可周年生产，短期内可获得大量实生苗等优点。本文旨在总结兰花组培快繁培养的研究进展。 　　1 外植体的选择 　　兰花组织培养根据所选外植体的不同可分为茎尖和侧芽培养、叶片培养、根尖培养、花器官培养等。 　　1.1 茎尖和侧芽 　　茎尖和侧芽顶端部分分生区的细胞具有分裂能力强，易诱导，遗传稳定等特性。对于远缘杂交所获得的品系，用此法可得到与母体遗传性状一致的植株。茎尖较适于复茎性兰花的快速繁殖，已经被有效用于大花蕙兰（Cymbidium）、卡特兰（Cattleya）、石斛兰（Dendrobium）、文心兰（Oncidium）、金线莲（Anoectochilus）、鹤顶兰（Phaius）、香子兰（Vanilla）、竹叶兰（Arundina）等兰花花芽和类原球茎（Protocorm like body，PLB）的诱导。这可能是由于茎尖及其周围组织较为幼嫩，容易脱分化并再分化成完整植株。但对一些单茎性兰花，如蝴蝶兰（Phalaeanopsis）、指甲兰（Aerides）等，摘取其茎尖就有可能损失母株，造成浪费 [1，2]，因此人们在实际应用中倾向于寻找其他可能的外植体。 　　1.2 叶片 　　与茎尖不同，叶片作为外植体，不需要母株做出牺牲，数量多，取材也不受季节如花期的限制。Wimber就率先从蕙兰的叶子中诱导得到PLB [1]。幼叶比老叶的诱导反应强，更容易诱导出体细胞胚，叶基部又比远轴端的叶尖强。万代兰（Vanda）幼嫩叶片整个表面都能诱导得到分生组织，而相对老的外植体，则局限于叶片基部；80 %的叶片基部都能够增殖。火焰兰（Renanthera imschootiana）在叶尖部位没有诱导反应时，叶基部仍能诱导出嫩芽，获得再生植株。而蓝色万代兰（V.coerulea）成熟植株的叶片并不能诱导得到嫩芽或者PLB [3，4]。这表明在同样的培养条件下，可以根据不同的诱导反应来判断外植体的来源和生理学年龄。切割方式和外植体大小均对PLB的诱导也有影响。横切比纵切效果好，6分片段的诱导率最高 [5]。 　　1.3 花梗和花梗芽 　　利用花梗或花梗芽进行快繁也是不必牺牲母株的一种方法。自Rotor利用蝴蝶兰离体花梗诱导得到蝴蝶兰组培苗后，这项技术被迅速广泛用于获得大量的蝴蝶兰种苗。目前蝴蝶兰的快繁方法中，许多都是利用花序基部的休眠芽进行快繁培养获得的。在诱导蝴蝶兰的PLB过程中，花梗芽的发育阶段、芽龄是影响诱导率的主要因素。成熟花梗诱导获得的再生芽较少；而幼嫩花梗能够更有效的诱导得到再生植株 [6]。除蝴蝶兰外，花梗培养已在万代兰，树兰，石斛兰，文心兰，苞舌兰等属中获得成功 [1]。 　　1.4 地下茎段 　　利用根状茎进行离体诱导得到小植株，具有简易可行的优点。根状茎可以通过种子诱导直接得到，也可以由假鳞茎上的侧芽诱导得到。对于许多陆生兰而言，尤其是对具有重要商业价值的兰花而言，这是一个非常有效的途径。通过根状茎诱导可以得到春兰、蕙兰、寒兰等的再生苗。对大部分寒兰的根状茎而言，BAP是最好的细胞分裂素；BAP的加入，能够减少分支，将分生组织转换为PLB，诱导根状茎顶部向上形成嫩芽，并长成植株 [7]。Chang等选取寒兰根状茎顶端1cm部位，置于含0.01～1 mg/lTDZ的培养基上，能够从根状茎茎尖诱导得到2～3个植株嫩芽 [8]。但Shimasaki等的研究表明，在常规的寒兰幼苗生产中，生长调节剂的应用并非必要 [9]。这可能是加入生长素后，会导致根状茎分生组织的细胞质区域减少，叶片形成受阻滞和引起分生组织派生物快速分离。 　　1.5 根段 　　对于多个兰花品种，通过根段进行植株再生的研究已有报道。利用气生根能够进行兰花繁殖，但形成植株的能力很低。美洲石斛的根系离体后在培养基中能长时间内保持成活，却无法形成芽或者PLB。有研究表明，