强光下一氧化氮对三角褐指藻EPA产量影响.PDFVIP

第 32 卷 第 1 期 天津科技大学学报 Vol. 32 No. 1 2017 年 2 月 Journal of Tianjin University of Science Technology Feb. 2017 DOI:10.13364/j.issn.1672-6510 强光下一氧化氮对三角褐指藻 EPA 产量的影响 许文宗，闫 爽，王黎颖，徐仰仓 (天津市海洋资源与化学重点实验室，天津科技大学海洋与环境学院，天津 300457) 摘 要 ：二十碳五烯酸 (EPA)是一种长链多不饱和脂肪酸 ，具有重要的医药价值．本文研究了光照强度和亚硝基铁氰 化钠 (SNP)分解产生的 NO 对三角褐指藻 EPA 产量的影响及机理．采用氧电极法探究光照强度与三角褐指藻光合速 率的关系 ，结果显示三角褐指藻的光饱和点为 126.3 µmol/ (m2 ·s)．采用气相色谱法检测 EPA 的含量 ，结果显示外源 NO 可通过促进强光下三角褐指藻的快速生长来提高强光下三角褐指藻 EPA 的产量，而对单位生物量中 EPA 含量并 没有影响 ；用血球计数板法检测三角褐指藻的生长速率，结果显示在光强 200 µmol/ (m2 ·s)时三角褐指藻出现了光抑 制 ，而 SNP 能解除这种抑制．探究 NO 促进三角褐指藻快速生长的机理 ，结果显示 NO 提高了乙醇酸氧化酶 (GO)的活 性．用实时荧光定量 PCR (Real-time PCR)检测外源 NO 对 GO 基因表达量的影响 ，结果显示 GO 的两个同工酶“GOX 和 GLY”的基因表达量均增强 ．采用 AMCA 开关法对纯化的 GO 进行 S–亚硝基化鉴定 ，结果显示 GOX 和 GLY 均 发生 S–亚硝基化修饰．分别采用 ISNO-AAPair、GPS-SNO 和 ISNO-PseAAC 方法预测 S–亚硝基化位点 ，结果显示 GLY 的 238 位、GOX 的 237 位和 332 位很可能是 NO 的修饰位点．因此，NO 提高 GO 活性的途径有两条 ：提高 GO 基 因的表达量；对 GO 酶蛋白进行 S–亚硝基化修饰．综上所述 ，NO 通过提高 GO 活性促进强光下三角褐指藻的快速生 长从而提高三角褐指藻 EPA 的产量． 关键词 ：EPA ；光照强度；三角褐指藻；S–亚硝基化；一氧化氮；乙醇酸氧化酶 中图分类号：Q93 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672-6510 (2017)01-0018-07 Effect of Nitric Oxide on EPA Yield in Phaeodactylum tricornutum under High Light Irradiance XU Wenzong ，YAN Shuang ，WANG