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子抗氧化的作用的研究

子抗氧化的作用的研究   【摘 要】对?_子水提物抗氧化性能进行研究。采用水杨酸法、DPPH?法,测定?_子水提物对羟基自由基、DPPH?自由基的清除能力。结果表明: ?_子水提物对DPPH?自由基、羟基自由基均具有一定的清除能力,在实验所选浓度范围内,清除DPPH?自由基、羟基自由基能力随浓度增加而增强,说明?_子水提物是一种天然有效的抗氧化剂。   【关键词】?_子;水提物;抗氧化性   ?_子(Eleusine coracana(L) Gaertn)为禾本科(Gramineae)?_属(Eleusine)植物,又称龙爪粟、鸭爪稗、龙爪稷、鸡爪粟、云南稗、雁爪稗、鸭距粟、野粟,主要分布于东半球热带及亚热带地区,我国长江以南及安徽、河南、陕西、西藏、湖南、广西等省区有栽培。其主要功效为补中益气,主治胃疾病。研究表明,每1g?_子粉末中含胰蛋白酶抑制物103.50u,几乎没有糜蛋白酶抑制物,枯草杆菌蛋白酶抑制物对细菌蛋白酶抑制作用强于对牛胰、糜蛋白酶的作用。以?_子代替米做大鼠饲料,可促进体生长,并使其肝中脂肪含量增高[1]。目前,国内外对?_子的药用价值研究较少,本文初步探讨了?_子水提物的抗氧化功效,为其在医药、食品和化妆品领域的应用提供了理论依据。   1.材料与方法   1.1材料和仪器   1.1.1材料   ?_子干品(购于广西宜州市农贸市场);1,1-二苯基-2-苦基苯肼 (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH?) 为sigma公司分装。无水乙醇、FeSO4、H2O2均为分析纯。   1.1.2仪器   UV-2501 紫外分光光度计:日本岛津;AR224CN型电子分析天平:奥豪斯仪器有型公司;FW100型高速万能粉碎机:天津市泰斯特仪器有限公司;HH-2数显恒温水浴锅:国华电器有限公司。   1.2 方法   药物制备:?_子干品粉碎过40目筛,称取3.000g,于500ml锥形瓶中,加入蒸馏水450ml,1000C水浴锅中,浸提45min。浸提完毕趁热抽滤,将滤液移入500ml容量瓶中,残渣用少量热蒸馏水洗涤2-3次,合并滤液倒入上述容量瓶中,冷却后用蒸馏水定容,摇匀。供测定用。   1.3 抗氧化试验   1.3.1有机自由基(DPPH?)清除能力测定方法[2]   将DPPH颗粒与少量无水乙醇混合,充分搅拌溶解,再以50%乙醇为溶剂,配制成0.05 mmol/L溶液。配制浓度为6.0、5.0、4.0、3.0、2.0 mg/mL 的药液,在最大波长处(测定最适波长为524nm),于直径1cm比色皿中,分别加入 0.5ml供试液,静置20min,测定各吸光度。每一吸光度平行测3次,取其平均值。以50%乙醇代替样品作为空白对照,吸光度为A0,以50%乙醇代替DPPH自由基溶液作为样底管,吸光度为 B,DPPH自由基清除能力测定计算公式如下:   清除率%=[1-(A-B) /A0]×100%   1.3.2羟基自由基清除能力测定方法[3]   在试管中依次加入6mmol/L 的硫酸亚铁1 mL,6 mmol/L 的水杨酸-乙醇溶液1 mL,分别加入1 mL 供试液(浓度为6.0、5.0、4.0、3.0、2.0 mg/mL 的药液),混匀后后加入0.1% 的H2O2溶液1 mL,以蒸馏水补足至总体积5 mL。其中对照管以1 mL蒸馏水代替样液,样底管以乙醇代替水杨酸溶液,摇匀后37 ℃水浴0.5h,离心,510 nm 处测定吸光值。清除率计算公式如下:   清除率( %)=[1-( A1-A2) /A0]×100%   2.结果与讨论   2.1对有机自由基(DPPH?)清除能力测定结果   DPPH?是一种很稳定的以氮为中心的自由基,在517nm处有强吸收峰,通常被用来检测抗氧化剂的抗氧化活性。当有自由基清除剂存在时,DPPH?会和清除剂提供的质子结合形成DPPH-H,引起A5l7nm降低,吸光值降低幅度越大则自由基清除率越高[4]。?_子对DPPH?的清除效果见图1,结果显示?_子DPPH?有较强的清除能力。且清除率呈现较好的量效关系。浓度为2.0mg/mL至6.0mg/mL时,对DPPH?的,清除率为21.86%至76.12%。   2.2羟基自由基清除能力测定结果   在活性氧中羟自由基化学性质最活泼,反应性极强,寿命很短,是己知的最强的氧化剂,几乎能和所有的细胞成分发生反应,如和蛋白质、核酸发生反应从而损伤生物体。这些损伤能引起衰老、癌症等多种疾病,因此清除?OH是对抗疾病的有效手段之一[5]。由图2可知,?_子对?OH有清除能力。且清除率呈现较好的量效关系,浓度为2mg/ml至6mg/ml之间对?OH清除率为9.83%至

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