植物不同组织可溶性蛋白提取和多肽组分差异研究.docVIP

植物不同组织可溶性蛋白提取和多肽组分差异研究 方案可行。最好用第二个。 实验目的: 1、掌握冷冻离心机的操作使用方法。 2、掌握植物可溶性蛋白的提取方法和原理。 3、掌握分光光度计的使用方法和原理。 4、掌握可溶性蛋白的定量测定方法和原理。 5、掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理和基本操作过程。 实验包括三个部分内容： 一、植物不同组织可溶性蛋白的提取。 二、植物可溶性蛋白含量的测定。 三、聚丙烯凝胶电泳分离可溶性蛋白。 原理: 植物不同组织可溶性蛋白的提取 植物材料中通常含有两类蛋白，一种是易溶于水主要存在于细胞基质、叶绿体基质和线粒体等细胞器基质中的可溶性蛋白，另一类是难溶于水主要存在于各种细胞器膜上的膜结合蛋白。将植物材料在一定的提取缓冲液和0～4℃低温下充分研磨，可溶性蛋白将溶解在提取缓冲液里，通过离心将未破碎细胞器和膜蛋白去除，得到的离心上清夜就是可溶性蛋白的粗提物。 离心机基本原理 ⒈离心力（centrifugal force，Fc）离心作用是根据在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。离心力（Fc）的大小等于离心加速度ω2X与颗粒质量m的乘积，即：FC＝mω2X 其中ω是旋转角速度，以弧度/秒为单位；X是颗粒离开旋转中心的距离，以cm为单位；m是质量，以克为单位。 ⒉相对离心力（relative centrifugal force