改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结肠中的应用.PDFVIP

27 2 Vol 27 No 2 第 卷第 期 中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志 . . . 2018 年 4 月 CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY April.2018 改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结 肠中的应用 * （中山大学附属第一医院病理科，广州 510080 ） 〔摘要〕目的 对乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法进行改良，使染色操作更加快速和简单，以便能用于术中先天性巨结 肠的快速病理诊断。方法 以传统的亚铁氰化铜法为基础并进行改良，将底物碘化乙酰硫代胆碱的浓度增加 10 倍，高浓度的 底物加快渗透组织，缩短孵育染色时间。在孵育染色后用 DAB （二氨基联苯胺）处理, 使阳性产物更加稳定，颜色由棕色 加深为棕黑色，不容易退色，更易于观察。结果 先天性巨结肠症的直肠黏膜固有层腺体之间可见增生的胆碱能纤维，乙酰 胆碱酯酶阳性呈棕黑色，而正常直肠黏膜固有层腺体之间没有增生的胆碱能纤维，乙酰胆碱酯酶染色为阴性。与传统的亚铁 氰化铜法相比较，本改良法染色特异性无明显差异，但孵育染色时间从原来的 60~120min 缩短至 10~15min。结论 本改良法 使乙酰胆碱酯酶染色操作比传统方法更加快速和简单，结果稳定可靠，可用于手术中先天性巨结肠的快速病理诊断，对临床 医生制定先天性巨结肠的治疗方案具有十分重要的意义。 〔关键词〕乙酰胆碱酯酶；组织化学染色；先天性巨结肠；术中先快速病理诊断 〔中图分类号〕R-331 〔文献标识码〕A DOI ：10.16705/ j. cnki. 1004-1850. 2018. 02. 011 Application of modified acetylcholinesterase histochemical staining in rapid diagnosis of Hirschsprung’s disease * Dong Yu, Yang Shicong, Wu Huiqun, Liang Yingjie Department of Pathology, First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080,China) （ Objective To modify current acetylcholinesterase histochemical staining procedure for rapid pathological diagno- 〔Abstract 〕 sis of Hirschsprung’s disease during surgery. Methods Based on conventional Karnovsky Roots method, new procedure increased the concentration of iodinated acetylthiocholine by 10 times, allowing a faster tissue infiltration and shorter incubation time. After incubation, diaminobenzidine (DAB) was appl