学生科研的项目的研究工作小结.docVIP

学生科研的项目的研究工作小结 　　1.项目选题的背景 　　背景：雌激素受体（Estrogen receptor，ER）是配体依赖的类固醇激素核受体超家族成员之一，分为α和β两种亚型。ER-α位于6q25～1，长140kb，编码由595个氨基酸残基组成的蛋白质。ER-α蛋白质一级结构从N端到C端共分为A～F六个功能区：A/B区为转录调控区，位于氨基末端，A/B区中有一个非配体依赖性转录激活功能区AF-1，它通过和基础转录因、辅助激活因子和其他转录因子相互作用，介导信号向下游蛋白传递，从而激活靶基因，A/B能调节ER和DNA的相互作用，选择正确的雌激素应答元件及调控靶基因表达；C区为DNA结合区，是富含碱性氨基酸和半胱氨酸的高度保守区；D区为多变的铰链区，允许受体弯曲、旋转或构象改变，形成受体二聚体，并与同向或反向重复反应元件结合以发挥作用，D区还含有核定位信号，具有稳定DBD的DNA结合作用；E/F区包括配基结合区，共调节因子结合表面、二聚化区和配基依赖性转录激活功能区AF-2。 　　2000年，Flouriot等研究首次发现ER-α66（传统观念的ER-α）的同源异构体。同先前的ER-α66相比，它剪切了A、B区，缺乏N末端173个氨基酸，分子量为46KD，故被命名为ER-α46。 　　2005年，王兆一等研究首次报告ER-α66的另一同源异构体——ER-α36，它剪切了A、B区及F区，缺乏N末端173个氨基酸及CN末端138个氨基酸，分子量为36KD，故被命名为ER-α36，且初步证明了ER-α36表达不完全依赖ER-α66，其功能类似于生长因子受体，很可能参与抑制ER-α66介导的经典雌激素信号传导通路并激活细胞膜介导促细胞分裂的雌激素信号传导。 　　ER是经典的核受体，是核受体超家族成员之一，是执行生长与分化、增殖与凋亡等重要细胞内生理功能的分子元件。ER与雌激素结合后，激活基因转录，从而发挥其生长调控作用。 　　近年国内外报道，许多不属于激素靶器官的肿瘤，如肺癌和脑膜瘤等测出了激素。 　　Tokunaga等首次发现胃癌可表达ER及孕激素受体，并推断其可能为雌激素依赖性肿瘤，以后国内外学者不仅应用不同的方法证实胃癌细胞ER表达的事实，而且开始给胃癌患者使用tamoxifen（TAM）。但至今TAM用于ER-α阳性，即传统的ER-α66阳性的胃癌的辅助治疗效果不佳，未被全球专家公认。因此，推测可能存在另外一种雌激素受体ER-α36途径激活胃癌细胞进入细胞周期。 　　本项目组前期研究从蛋白水平及mRNA水平证实胃癌培养细胞株SGC-7901、MKN45、MKN28、AGS中表达ERα36，且人体胃癌组织均表达ERα36，且证实ERα36参与胃癌雌激素信号转导。 　　笔者2009年在王兆一实验室研究发现，ER-α36在乳腺癌细胞株MCF7细胞周期不同时相差异性表达。 　　选题意义：本研究拟通过对雌激素受体ER-α36在胃癌细胞株SGC7901G0与G1期表达差异性研究，探讨ER-α36在胃癌细胞周期中的作用，从而为胃癌的早期检测及靶向治疗提供理论依据。 　　2.项目成员的组成、特长、分工及成员间相互协调配合的情况，导师指导情况 　　本项目组成员均为女生，细心、认真、负责，成员组同学相互合作、配合好，基本操作均由学生完成。导师指导学生项目申报、教授HE染色技术及原理、教授免疫荧光染色技术及原理、协助学生完成ER36免疫荧光染色过程、指导学生免疫荧光及HE阅片。 　　3.项目的创新点与特色 　　将新发现的雌激素受体ER-α36运用于胃癌细胞周期的研究，首次提出ER-α36影响胃癌细胞周期的观念，具有一定的创新性，为胃癌的激素治疗开辟了新思路。 　　4.项目实施的进展情况及取得的创新成果 　　完成了①SGC7901细胞培养；②同步化处理SGC7901细胞（G0期采用血清饥饿法，M采用秋水仙碱阻滞法）并制作细胞爬片；③细胞爬片免疫荧光细胞化学染色观察同步化处理G0及M细胞的ERα36表达差别。 　　5.项目实施过程中的收获与体会 　　通过指导学生科研，我深刻体会到学生科研不仅培养了学生的创新思维能力，而且提高了学生独立思考的能力，还培养了学生的动手操作能力。 　　让学生参与科研，不仅提高了学生的观察能力、分析问题的能力及动手操作的能力，而且培养了学生的科研能力。在实验研究过程中，学生从课题的文献综述、选题立项、实验操作到实验报告撰写，模拟了研究生的研究过程，提供了学生一个科研思路。此外，调动了学生的探究科学的积极性。 　　另外，通过学生科研的指导，提高教师的思想素质和业务素质。进行科研思维能力培训及多项综合性实验技能的培训是一种新型的实验教学模式。学生科研要求指导教师不仅具有扎实的基础理论知识，熟练的操作技能，而且积极跟踪学科发展