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浅谈影响食用菌固体培养基灭菌的因素 6中国食用菌EDIBLEFUNGIOFCHINAVo1.17,N0J6 浅谈影响食用菌固体培养基灭菌的因素 , b// 蔡爱群 (广东韶关大季至泵—关5l2005) 摘要本文结合多年的教学实践,分析影响食用茵 固体培养基常压灭茵和高压灭茵效果的因素,以利于提 高食用茵二,三级茵种制作和熟料栽培的成功率. 茵 璺竺苎查查堂昼墨堇丛 三级菌种的制作和金针菇,猴 头菇等熟料栽培一般采用固体培养基,接种前都需 进行灭茵,常用的灭菌方式有常压灭菌和高压灭菌 等,而灭菌彻底与否是二,三级菌种制作和熟料栽 培成功的关键,它还直接影响到菌种场的信誉和经 济效益,食用菌栽培者的收入及食用菌栽培实践教 学的顺利进行. 1影响固体培养基常压灭菌效果的因素 常压灭菌法是目前国内食用菌二,三级菌种制 作和熟料栽培中普遍采用的培养基灭菌方法,尤其 适用于三级菌种制作和熟料栽培的培养基灭菌,为 了更好地达到常压灭菌的目的,必须充分了解与熟 悉影响常压灭菌效果的因素.主要因素有主料预湿 适宜,控制灭菌前培养基中微生物自繁生物量,料 袋的排放方式,灭菌灶的设计,灭菌灶体下层温度 保持100~C12～14h等. 1.1主料预湿适宜主料预湿是否适宜对灭菌效 果有明显的影响.如预湿不透,不均匀时,主料少 数呈干燥状态,湿热蒸汽就难穿透到干料中间达 不到彻底灭菌的目的.如预湿过度,会使培养基含 水量过高,导致菌丝生长缓慢,甚至停止生长.如 主料量少时,可把预湿过度的料,用手挤握至适宜 的含水量,再拌入辅料. 1.2灭菌前培养基中微生物的自繁生物■培养 基灭菌前,含有大量的微生物,当原材料处于干燥 条件下,它们都呈休眠或半休眠状态.培养料一旦 预湿,休眠或半休眠的微生物得到生长繁殖所需的 水分,就恢复活性,迅速增殖.气温高时,若装料 时间拉长或装完料未及时灭菌,细菌,酵母菌等则 大量繁殖,使培养基酸败,灭菌难以彻底.因此, 装袋(瓶)应尽可能快完成,装完后立即进行灭 菌,从而控制灭菌前培养基中微生物的自繁生物 量. 1.3灭菌灶内料袋的排放方式目前国内菌种瓶 收稿日期1998—08—28 D 丁7zD.; 多数都由玻璃吹制成的,有固定体积.灭菌时}湿 热蒸汽能较好地在料瓶间隙之间循环,使料瓶受热 均匀,灭菌彻底.为了方便购种者携带,近年来大 多数采用聚丙烯,低压聚乙烯薄膜袋代替菌种瓶作 为制种或栽培的容器,这种容器无固定体积,入灶 重叠堆积后,易受挤压,使料袋问的间隙被堵塞, 灭菌时湿热蒸汽难以穿透,受热不均匀,不易遗到 彻底灭菌的效果.为了克服这种情况,可用木条, 竹条或钢条制作成周转筐,再把料袋单排竖放进筐 内,各筐叠放时应注意留有间隙,然后再进行灭 菌,或直接把料袋排放成井字型以减少料袋问 的挤压和增加料袋的间隙,以提高灭菌效果.. 1.4灭菌灶的设计常压灭菌灶由炉灶和灭菌蒸 汽仓组成.为了达到灭菌目的,提高灭菌效果,对 灭菌灶的设计有一定的要求,如:(1)炉灶和灭菌 仓都可用砖和水泥砌筑,灭菌仓壁可砌成空心墙, 利于保温.(2)灭菌仓的仓顶砌成圆拱形,利于拱 顶的凝集水沿内壁淌下不打湿料袋(瓶)的棉塞; 仓顶留3个排气孔,孔径为1～2cm,利于灭菌时 使锅内产生的水蒸汽穿过灭菌仓逸出,促使蒸汽在 仓内均匀运动.(3)炉灶的铁锅直径与灭菌仓的体 积保持1:2.5的比例.如铁锅为lm,灭菌仓的体 积不得大于2.5m3,以保证有足够的热量.(4)灭 菌仓的容量一般保持排放500～1500瓶(袋).由 于常压灭菌灶的铁锅水容量,受热面积,蒸发面积 和单位时间内最大汽化量都是一定的,如果灭菌仓 设计容量过大,需灭菌的料袋(瓶)总吸收热量也 相应增加,必然导致灭菌仓内温度上升缓慢,料袋 (瓶)内微生物自繁量增加,从而影响灭菌效果. 且灭菌初期,切记用旺火猛攻,尽可能在短时间内 (4h内)使仓体下半部的温度达到100oC,以控制 料袋(瓶)内微生物自繁量的增加. 1.5灭菌仓下层温度保持100~q,12—14h(小时) 常压灭菌是否彻底,关键在于能否连续地使灭菌仓 下层温度始终保持100~C,12～14h.水沸初期,袋 (瓶)内不可能立即达到100~C的有效灭菌温度. 因为热蒸汽传导先从仓顶开始,然后逐渐向中,下 层蔓延.在一般火势下,大约需要3～5h才 能达到热平衡.当灭菌仓下半部温度达到100℃ 第l7卷第6期中国食用菌EDIBLEFUNGIOFCHINA7 时,还需6～8h才使料袋(瓶)培养基中心微生物 基本致死,从而达到灭菌目的.所以,以往常压灭 菌时,水沸上汽后,开始计时保持12—14h作为灭 菌时间是难以达到较好灭菌效果的. 2影响固体培养基高压灭菌效果的因素 高压灭菌法也是固体培养基灭菌常采用的方 法,而影响高压灭菌效果的因