利用重组大肠杆菌生产双乙酰-生物技术通报.PDF

生物技术通报 # # BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 11 1 赵宏峰 边英男 黄伟达 (, 200433) : 大肠杆菌自身代谢特征具有发酵生产双乙酰的天然 势利用 PCR技术, 以广泛用于双乙酰生产的Lactococ- cus lactis 基因组 DNA 为模板, 克隆得到 A-乙酰乳酸合成酶基因A-als, 将其构建在表达载体 pET-30a上与能够高效表达 3种 大肠杆菌来源 H SP 70家族分子伴侣的 pK JE 7质粒共同转化E. coli BL21( DE3) 利用目的蛋白质分子伴侣共表达的方法, 首 次获得了能够高效表达具有酶活力的 A-乙酰乳酸合成酶的重组大肠杆菌在静置培养条件下, 能够在该菌株的培养基中检 测到双乙酰的生成融合蛋白酶在温度为 30- 40e 和 pH 在 6- 7之间时具有较高的酶活, 以丙酮酸为底物, 该酶最适 pH 为 6. ,