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第37卷摇 第12期 北 京 林 业 大 学 学 报 Vol.37,No.12
2015年12月 JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY Dec. ,2015
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DOI:10.13332/ j.1000 1522
ThMYB3和 ThDof2对 ThVHAc1基因表达的调控
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杨桂燕 摇 赵摇 震摇 赵玉琳 摇 张凤娇 摇 高彩球
(1东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室摇 2 西北农林科技大学林学院)
摘要:ThVHAc1基因能响应干旱、盐、重金属等胁迫诱导,该基因能有效提高转 ThVHAc1基因酵母的多种抗逆能力。
为进一步研究ThVHAc1基因的抗逆调控机理,本研究利用酵母单杂交技术钓取 ThVHAc1可能的上游调控因子,并
利用基因枪瞬时共转化技术进行初步验证。 酵母单杂交结果显示,ThMYB3基因能识别 ThVHAc1基因上游MYB顺
式作用元件和含有MYB元件的启动子片段。 ThDof2 基因能识别 ThVHAc1基因上游 DOF顺式作用元件和含有
DOF元件的启动子片段。 但 ThMYB3 和 ThDof2 均不能识别突变后的元件及含对应突变元件的启动子片段。 将
ThMYB3和ThDof2分别构建成效应载体,各元件、突变元件、启动子片段及突变的启动子片段分别构建报告载体进
行共表达验证。 结果发现:效应载体ThMYB3和含 MYB元件及含 MYB元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体,
ThDof2和含DOF元件及含DOF元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体瞬时共表达烟草叶片能观察到GUS染色,
且GUS活性较高;而与相应突变元件及片段的共转化则观察不到烟草叶片的GUS染色,且GUS活性很低。 说明只
有非突变的元件和启动子片段才能与效应载体进行互作识别,激活GUS基因的表达,验证了酵母单杂交获得的上
游调控基因的识别特异性。 表明ThMYB3和ThDof2可能通过与相应启动子元件的结合调控ThVHAc1基因。
关键词:刚毛柽柳;酵母单杂交;VHAc基因;启动子;调控因子
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中图分类号:Q943郾2;S718郾4摇 摇 文献标志码:A摇 摇 文章编号:1000 1522(2015)12 0001 06
1,2 1 1 1 1
YANG Gui鄄yan ; ZHAO Zhen ; ZHAO Yu鄄lin ; ZHANG Feng鄄jiao ; GAO Cai鄄qiu . Upstream
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regulators of ThVHAc1. Journal of Beijing Forestry University (2015)37(12) 1 6 [Ch,16 ref.]
1State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding,Northeast Forestry University,150040,Harbin,
Heilongjiang,P. R. China;
2 Laboratory of Walnut Research Center, College of For
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