产氢微生物在不同pH条件下差异表达蛋白功能的分析-化学工程与技术专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Classified Index：TQ116.2 Dissertation for the Master Degree in Engineering Hydrogen producing microorganisms in different pH condition analysis of the differences in protein function Candidate： Chaoyu Zhang Supervisor： Qin Zhi Academic Degree Applied for： Master of Engineering Speciality： Chemical Engineering Date of Oral Examination： June, 2015 University： Harbin University of Science and Technology 哈尔滨理工大学硕士学位论文原创性声明 本人郑重声明：此处所提交的硕士学位论文《产氢微生物在不同 pH 条 件下差异蛋白功能的分析》，是本人在导师指导下，在哈尔滨理工大学攻读 硕士学位期间独立进行研究工作所取得的成果。据本人所知，论文中除已注 明部分外不包含他人已发表或撰写过的研究成果。对本文研究工作做出贡献 的个人和集体，均已在文中以明确方式注明。本声明的法律结果将完全由本 人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 哈尔滨理工大学硕士学位论文使用授权书 《产氢微生物在不同 pH 条件下差异蛋白功能的分析》系本人在哈尔滨 理工大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的硕士学位论文。本论文的研 究成果归哈尔滨理工大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发 表。本人完全了解哈尔滨理工大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学 校保留并向有关部门提交论文和电子版本，允许论文被查阅和借阅。本人授 权哈尔滨理工大学可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文，可以公布 论文的全部或部分内容。 本学位论文属于 保密 ，在 年解密后适用授权书。 不保密 √ (请在以上相应方框内打√) 作者签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 I - 哈尔滨理工大学工学硕士学位论文 哈尔滨理工大学工学硕士学位论文 产氢微生物在不同 pH 条件下差异表达蛋白功能的分 析 摘 要 厌氧暗发酵制氢技术是一种较为高效的微生物制氢技术，该技术具有产 氢效率高、制氢效果稳定、易于工业化生产等特点，并且将除废和产能有机 地结合在一起，因而开展厌氧发酵微生物的研究具有重要意义。本实验在温 度为 35℃条件下，设定 pH 5.5、pH 6.0、pH 6.5、pH 7.0、pH 7.5 五种不同 pH 值梯度条件，通过微生物发酵罐 pH 值的自动控制系统，使产氢菌在培养 过程中维持恒定的 pH 值，研究在间歇产氢微生物发酵罐中不同恒定 pH 条件 对产氢菌产氢性能的影响，并分析不同培养时间发酵液生物量及残余还原糖 浓度的变化规律。本研究分别选取 pH5.5 和 pH6.5 培养条件下产氢速率最大 时期的产氢菌进行蛋白质鉴定，对差异表达蛋白质进行数据检索和对比分析， 获得微生物产氢代谢相关的功能蛋白质信息，并分析了差异表达蛋白质在微 生物产氢代谢中可能的作用机制。 微生物产氢发酵罐的恒定 pH 值控制研究结果表明，在 pH 值为 5.5 的条 件下，微生物发酵的累计产气量为 5940mL/L，累计产氢量为 1872mL/L。氢 气含量为 31.5%。在 pH 值为 6.5 条件下，累计产氢量为 3412 mL/L，累计产 氢量最高，氢气含量为 33.3%。同时发酵液中残余还原糖浓度由 22g/L 降至 3.52g/L，还原糖的利用率最高为 84%，该菌种的最适产氢 pH 条件为 pH 6.5。 在 pH 值为 pH 7.5 条件下，累计产气量为 4829mL/L，累计产氢量为 1046mL/L， 氢气含量为 21.6%。 利用双向电泳技术获取 pH 5.5 和 pH 6.5 两组不同恒定 pH 条件下产氢性 能最优、速率最快时，产氢微生物差异蛋白质的表达谱图。使用 Image Master 6.0 程序软件对数据进行统计分析，对两组实验统计学重复的点进行匹配， 对匹配后差异蛋白质点的表达丰度变化比较分析，获得了 63 个显著变化的差 异表达蛋白质点，其中有 34 个上调的差异表达蛋白质点和 29 个下调差异表 达蛋白质点。将上述蛋白质斑点进行质谱鉴定，再通过 NCBI 等数据库进行 检索，确定差异表蛋白质的种类和名称。检索到 29 种差异表达蛋