常温机械灌注对猪劈离式肝移植保护作用的实验研究-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 本论文属于  不保密 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医 天津医科大学博士学位论文 中文摘要 目的 肝脏移植已成为目前治疗各种终末期肝病的主要方式，由于供肝的 严重短缺，世界各地的移植中心想尽各种办法扩大供肝池，其中包括活体供肝移 植 （ Living donor liver transplantation ， LDLT ）、劈离式肝移植 （ Split liver transplantation，SLT)、边缘供肝（老年肝脏及心脏停跳后的肝脏）。LDLT 胆管 及血管并发症机率比 SLT 较高，而 SLT 的优点则是它排除了同 LDLT 相关的潜 在的供体并发症和死亡风险。SLT 分体外劈离和体内劈离。国内供肝多为心脏死 亡器官捐献（Donation after circulatory death，DCD），供肝在体外进行劈离，即 在冷保存过程中劈离。SLT 供肝体外劈离过程延长了供肝冷保存时间，加重了缺 血再灌注损伤（Ischemia-reperfusion injury，IRI），研究表明供肝的冷缺血时间 严重影响肝移植的预后，冷缺血时间过长与移植物原发无功能（Primary graft nonfunction，PNF）和术后胆道并发症直接相关。常温机械灌注（Normothermic machine perfusion，NMP）主要是通过连续提供氧气、营养物质等模拟体内生理 环境，维持细胞的生理机能及代谢。本研究拟构建简单、稳定、实用的 NMP 保 存系统，并探讨 NMP 对猪 SLT 的保护作用。 方法 1. 肝脏劈离过程中 NMP 保存装置的建立与评价：利用蠕动泵、膜式 氧合器、水浴箱、滤栓器、流量压力传感器等设备成功建立肝脏 NMP 装置。通 过对 4 只巴马小型猪的肝脏在体外 NMP 保存过程中劈离，观察保存劈离期间肝 动脉、门静脉的流量及压力变化、保存的温度、灌注液的血气分析、丙氨酸氨基 转氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转氨酶（Aspartate aminotransferase，AST）、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）、碱性磷酸 酶（Alkaline phosphatase，ALP）指标、胆汁量、肝组织的常规病理变化等，验 证在肝脏劈离过程中此 NMP 保存装置的稳定性及实用性；2.猪原位无转流劈离 式肝移植模型的建立：选用健康巴马小型猪 20 只，在冷保存过程中进行劈离后， 采用无转流技术建立原位劈离式肝移植模型，观察手术过程中的血流动力学指 标、术后 5 天 ALT、AST、总胆红素（Total bilirubin，TBIL）、直接胆红素（Direct bilirubin，DBIL）等肝功能指标及术后并发症发生情况，掌握劈离式肝移植手术 技巧及验证模型的稳定性；3. NMP 对猪劈离式肝移植的保护作用：选用健康巴 马小型猪 24 只，随机分为两组，A 组在 NMP 保存过程中劈离，B 组在 UW 液 单纯低温保存过程中劈离，然后两组均行原位无转流劈离式肝移植术，比较术后 5d 血清生化指标、肝组织病理变化。 结果 1. 成功建立了肝脏 NMP 装置，对小型猪肝脏进行保存劈离过程中， 门静脉和肝动脉的压力及流量控制、温度控制均稳定；保存劈离期间随着劈离的 I 进行，胆汁分泌量逐渐减少；保存劈离过程中随着劈离的进行，ALT、LDH 水 平逐渐增高，而 ALP 保持在一个相对稳定的水平，AST 在灌注保存开始时的水 平和基础值接近，随着劈离的进行，AST 水平逐渐增高；肝组织常规病理提示 常温机械灌注保存劈离后肝脏细胞结构及汇管区基本正常。2. 经过早期的技术 训练后，猪肝移植术后 5 天存活率达 50%，无手术相关并发症，死亡 5 例，其中 2 例考虑腹腔内出血，其余 3 例考虑腹腔渗