超声激发相转变纳米乳及其多模式成像研究-生物制药工程专业论文.docx

万方数据 万方数据 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本研究的研究做出贡献的个人和集体，均已 在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□， 在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打―√‖） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 摘 要? 肝癌作为一种常见的恶性肿瘤，严重危害着人们的健康，一般常用超声和磁共 振成像等方法进行检测，但在小肝癌的诊断方面仍有缺陷。为了提高肝癌诊断的准 确性，目前常将多种成像模式结合使用，同时辅以造影剂实现系统增强。微泡是一 种常用的超声造影剂，而且在磁场中能引起磁共振信号的微弱变化，但是微泡的粒 径较大，不能穿过肿瘤血管内皮细胞间隙，只能作为血管内造影剂；目前市售微泡 SonoVue 注入生理盐水后的稳定性较差，很难作为载药系统包载其他探针或药物进 行多模式诊断或治疗。因此我们采用 SPG 膜乳化法制备了一种可以在超声激发下发 生相转变的纳米乳，包载荧光染料 DiR 和磁性纳米粒 SPIO 后考察其体内外荧光/磁 共振/超声成像能力，在此基础上研究不包载 SPIO 的荧光纳米乳体外荧光/磁共振/超 声成像及用于原位肝癌检测的能力。得到的主要研究结果如下： (1) 考察并优化了 SPG 膜乳化法制备聚合物纳米囊的条件和工艺参数，并在此 基础上成功制备了纳米乳。纳米乳的粒径为 348.7 ± 2.3 nm，PDI 为 0.072 ± 0.010， zeta 电位为- 3.36 ± 0.43 mV。TEM 下显示其为明显的圆泡形核壳结构，而且一年内 的稳定性较好。 (2) 评测了纳米乳的相转变特性。全氟戊烷（PFP）纳米乳仅在 37℃下很难发生 相转变，当温度升到 50℃时才发生这种转变。但是当给予超声激发后，纳米乳很快 发生液气相转变形成微泡。 (3) 制备的 DiR-SPIO-NDs 纳米乳粒径为 385.0 ± 5.0 nm，PDI 为 0.169 ± 0.011， zeta 电位为 11.40 ± 1.51 mV。TEM 显示 DiR-SPIO-NDs 纳米乳呈球形结构且分布较 均匀，SPIO 纳米粒分散于聚合物层，而 DiR 荧光染料分散于整个纳米乳内部。纳米 乳浓度约为 2.8 × 109 /mL。体外 MRI 评测 DiR-SPIO-NDs 纳米乳的 r2 弛豫率为 127.9 mM-1s-1。体外荧光成像显示 DiR-SPIO-NDs 纳米乳的荧光信号强度与纳米乳浓度呈 线性正相关。相转变实验评测了 DiR-SPIO-NDs 纳米乳超声激发下可以发生相转变， ? 本课题得到国家 973 项目―肝癌治疗的新型纳米药物研究‖（No. 2012CB932500）的支持。 I II万方数据 II 万方数据 粒径增大约 2.5 倍，转变为微泡后的超声视频强度为 19.18 dB。 (4) 考察了 DiR-SPIO-NDs 纳米乳的生物相容性及体内多模式成像能力。MTT 结果显示不同浓度的 DiR-SPIO-NDs 纳米乳对 HepG2 和 HL-7702 细胞没有明显的毒 性，细胞存活率均在 80%以上。体外溶血试验评测其血液相容性好，溶血率低于 5%。 正常裸鼠静脉注射 DiR-SPIO-NDs 纳米乳后，DiR 荧光主要集中于肝脏并且可以维持 29 h 以上。正常大鼠静脉注射 DiR-SPIO-NDs 纳米乳后，10 min 内肝脏组织的 T2 加 权 MRI 信号迅速降低，而且随着时间延长，肝脏的低信号可以持续 7 h 以上。荷肝 癌皮下瘤裸鼠瘤内注射 DiR-SPIO-NDs 纳米乳后，临床超声探头辐照下，1 min 内纳 米乳即可发生液气相转变形成微泡，在肿瘤内产生超声成像，并且可以持续 4.5 h 以 上。说明 DiR-SPIO-NDs 纳米乳具有作为荧光/磁共振/超声三模式成像造影剂的潜力。 (5) 成功制备了 DiR-NDs 纳米乳。粒径为 708.7 ± 34.8 nm，PDI 为 0.154 ± 0.034， ze