常用烤瓷合金对细胞凋亡信号分子基因表达与蛋白表达的影响-口腔临床医学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 4 常用烤瓷合金对细胞凋亡信号分子基因表达与蛋白表达的影响 【摘要】 目的：研究镍铬，钴铬，纯钛，钯基，金铂 5 种常用烤瓷合金对小鼠肺成纤 维细胞（L929）细胞凋亡信号分子基因表达水平与蛋白表达水平的影响。 方法：（1）镍铬，钴铬，纯钛，钯基，金铂 5 种烤瓷合金分别经过 1 次熔铸， 获得片状试件并分别使用 DMEM 细胞培养液进行浸提 72 小时后获得上述 5 种烤 瓷合金试件的浸提液 2）Real-time qPCR 检测上述 5 种烤瓷合金浸提液培养 L929 细胞 48 小时后各合金组以及阴性对照组细胞胞质中 Caspase-3、Caspase-8、 Caspase-9、细胞色素 C、Bax，Bcl-2、Fas、Fasl 等信号分子的 mRNA 表达水平 的变化；（3）Western blot 检测上述 5 种烤瓷合金测试试件的浸提液培养 L929 细 胞 48 小时后各合金组以及阴性对照组细胞胞质中 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表 达水平的变化。 结果：（1）经过 Real-time qPCR 检测发现：金铂合金组和钯基合金组 Bcl-2 的 mRNA 的相对表达量大于阴性对照组（P0.05）；镍铬合金组 Bax 的 mRNA 相对表达量大于阴性对照组（P0.05）；镍铬合金组与纯钛合金组 Caspase-9 和 Caspase-3 的 mRNA 的相对表达量大于阴性对照组（P0.05）；5 种烤瓷合金组 Caspase-8 的 mRNA 相对表达量均小于阴性对照组（P0.05）；金铂合金组细胞 色素 C 的 mRNA 相对表达量小于阴性对照组（P0.05）；其他 4 个合金组细胞色 素 C 的 mRNA 相对表达量均大于阴性对照组（P0.05）；镍铬合金组、钯基合金 组 、 金 铂合 金组 和 钴铬 合 金 组 Fas 的 mRNA 相 对 表 达量 大 于阴 性 对 照 组 （P0.05）；镍铬合金组、钯基合金组和钴铬合金组 Fasl 的 mRNA 相对表达量大 于阴性对照组（P0.05）。 （2）经过 Western blot 检测发现：5 种烤瓷合金组的 Caspase-9 蛋白的表达 均高于阴性对照组（P0.05）；金铂合金组、钯基合金组、纯钛合金组以及钴铬 合金组的 L929 细胞胞质中 Caspase-3 蛋白的表达高于阴性对照组（P0.05）；镍 铬合金组的 L929 细胞胞质中 Caspase-3 蛋白的表达低于阴性对照组（P0.05）。 结论：（1）不同烤瓷合金在细胞培养液中析出的不同离子将会对细胞凋亡相 关信号分子的 mRNA 和蛋白表达产生不同程度的影响；（2）镍铬、钴铬、纯钛、 钯基和金铂等 5 种常用烤瓷合金可能不通过外源性信号转导途径诱导细胞凋亡； （3）镍铬、钴铬、纯钛、钯基和金铂等 5 种常用烤瓷合金可能通过内源性信号 转导途径诱导细胞凋亡；（4）金铂合金和钯基合金可能通过 Bcl-2 信号分子对其 他促凋亡信号分子的抑制作用来阻止细胞凋亡的发生。 关键词：烤瓷合金；细胞凋亡；Bcl-2；Bax；Caspase-3；Caspase-8；Caspase-9； 细胞色素 C；Real-time qPCR；Western Blot Effects of Metal-Ceramic Alloys on Apoptosis Signaling Molecules’ Genes and Proteins Expression 【Abstract】 Objective: To investigate the expression of apoptosis signaling molecules’ genes and proteins affected by Ni-Cr,Co-Cr,CP Ti,Pd-base and Au-Pt metal-ceramic alloys in mouse lung fibroblasts cell (L929) . Methods: (1)Ni-Cr, Co-Cr, CP Ti, Pd-base and Au-Pt metal-ceramic alloys were cast for one time to obtain sheet-shaped specimens. DMEM was used to infuse 5 different kinds of ceramic alloy’ specimens for 72 h to get 5 different kinds of ceramic alloy’ leaching liquor. (2) The mRNAs’ expression of Caspa