草鱼鱼鳞胶原蛋白提取分离工艺的研究-食品科学专业论文.docxVIP

独创性声明 本人 FU 明所呈交的论文於我个人在 !J I 旨导下迸行的研究工作及耳旦得，问:r!ff究成 果.尽我所钮，除了文内特别加以标注和致 t内地方外，论文中小包 含其他人己生在发 表统撰写过的研究成果，也-1包含为获得安徽农业大学或其它教 (J机构的学仪戍区-I 而使用过的材料.0 勺我一同工作的同志对牛;明究所做的任何以献均已在论文中作: ]PJ. 确的说明并炭示了谢 Z虫， 研究生创:一严阵一 时间: 7，.aj] 年 J 月 b H 关于论文使用授权的说明 本人完全了f贸交徽农 k 大字有 关1* 1、使周学位论文的规定，即:学校仨权保留 送交论文的复印件和秘犁，王:严论文被-A I浏采H昔|宠 ，可以采用影印、缩回成扫摘等 制子段保存、汇编学位论义;‘ l叶意安徽农业大学可以用水同方式在-1同媒体上发炭、 传播学佼iQ文的令部成部分内容. (保密的学位论立·在解密后用道守此协议} -8「扫时间:).v13 作 4 月 6 -8「 扫 赵时间:[八J{ 3 年 μ 赵 I I 中文摘要 胶原蛋白（collagen）是一种白色、不透明、无支链的纤维蛋白质。分子量为 30 万道尔顿。胶原蛋白是人体留住钙质的主要成分之一，对人体的生长、发育具有 极其重要的作用。鱼鳞含有丰富的胶原蛋白，可作为胶原蛋白提取的原料。以草鱼鱼 鳞为材料，对胶原白蛋提取工艺进行考察、摸索，并对提取结果进行分析。 鱼鳞的主要成分有水分、灰分、粗蛋白、少量的鸟嘌呤和卵磷脂。对鱼鳞进行主 要成分测定，可得到其中水分、灰分、粗蛋白的含量分别为 14.08%、25.58%、58.32%； 粗蛋白中的胶原蛋白占鱼鳞的含量为 51.24%。 脱钙工艺：以单因素设计分析得出最优脱钙方式。具体脱钙参数为：EDTA 浓度 0.5mol/L、脱钙时间 24h、料液比 1:50、脱钙温度 25℃，脱钙两次。超声波辅助脱 钙的结果表明，超声波辅助脱钙的效果并不明显。 除杂蛋白工艺：分析除杂单因素试验的结果，得出具体的除杂参数为：料液比 1:40、碳酸钠溶液浓度 0.3mol/L、脱杂时间 6h、脱杂温度 20℃，除杂三次。超声 波辅助除杂对于除杂效果有一定帮助，在超声波频率为 60Hz 时除杂效果较好。 酸溶性胶原蛋白（Acid-soluble collagens）提取工艺：以经过前处理过程的草 鱼鱼鳞为原料，以醋酸浓度、提取时间和提取温度作为影响因子，进行单因素提取研 究；为了更准确的分析各个因素的相互交互影响，采用响应面法分析了醋酸浓度（A）、 提取时间（B）和提取温度（C）对 ASC 提取率的影响，方差分析表明，对提取影响最 显著的是温度（C），其次是提取时间（B）和醋酸浓度（A）。提取的最佳工艺条件为： 乙酸浓度 0.98mol/L、提取时间 24.68h、提取温度 28℃。在此条件下，ASC 提取率预 测值为 15.47%。由于考虑实际操作的可行性和方便性，取乙酸浓度 1 mol/L、提取时 间 25h、提取温度 28℃作为实际操作工艺条件。此后进行的验证试验结果表明，该最 佳工艺条件下提取的可重复性较好，结果稳定可靠。 酶溶性胶原蛋白（Pepsin-soluble collagens）提取工艺：以经过前处理过程的 草鱼鱼鳞为原料，以料液比、提取温度、提取时间和加酶量作为影响因子，进行单因 素提取研究；为了更准确的分析各个因素的相互交互影响，采用响应面法分析了料液 比（A）、提取温度（B）、提取时间（C）和加酶量（D）对 PSC 提取率的影响，方差分 析表明，对提取率影响显著的是料液比（A），其次是提取温度（B）、加酶量（D）和 提取时间（C）。提取的最佳工艺条件为：料液比 1:77、温度 25℃、时间 24h、加酶 量 2.53%。在此条件下，PSC 提取率预测值为 24.04%。由于考虑实际操作的可行性和 方便性，取料液比 1：77、提取时间 24h、提取温度 25℃，加酶量 2.5%作为实际操作。 此后进行的验证试验结果表明，该最佳工艺条件下提取的可重复性较好，结果稳定可 II II 靠。 对 ASC 和 PSC 的粗提物进行纯化，纯化后的 ASC 和 PSC 纯度分别为 94.1%和 90.8%。 胶原蛋白氨基酸分析结果为：ASC 和 PSC 水解液中的游离氨基酸总量分别为 98.80% 和 92.06%，两者羟脯氨酸含量分别为 9.70%和 11.6%。对比本研究的提取胶原蛋白氨 基酸分析结果与前人Ⅰ型胶原蛋白氨基酸分析结果，可以看出，草鱼鱼鳞胶原蛋白为 典型的Ⅰ型胶原蛋白，ASC 和 PSC 提取工艺参数研究结果可靠。 关键词：鱼鳞，羟脯氨酸，提取，工艺参数，胶原蛋白 i i Abstract Fish scal