槲皮素—7—硫酸酯钠体外抗氧化的作用.docVIP

槲皮素—7—硫酸酯钠体外抗氧化的作用 　　[摘要] 目的 探讨槲皮素-7-硫酸酯钠（SQMS）的体外抗氧化活性。 方法 取小鼠肝组织，匀浆，体外孵育，分光光度法检测不同浓度SQMS（0.10、0.25、0.50 mmol/L）对肝组织中丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。 结果 与空白组相比，不同浓度SQMS（0.10、0.25、0.50 mmol/L）均能显著降低肝组织中MDA的含量；中、高浓度SQMS（0.25、0.50 mmol/L）能显著升高肝组织T-AOC；低、中浓度SQMS（0.10、0.25 mmol/L）对肝组织SOD活力有显著升高作用。 结论 SQMS具有较强的体外抗脂质过氧化作用及抗氧化能力，其抗氧化可能与提高SOD活力有关。 　　[关键词] 槲皮素-7-硫酸酯钠；肝组织匀浆；体外；抗氧化 　　[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）06（c）-0014-03 　　活性氧所引起的氧化应激参与了很多疾病的病理生理过程，氧自由基是机体组织多种疾病的发病源，例如缺血再灌注损伤、阿尔茨海默病、帕金森症等。活性氧包括过氧化氢、超氧阴离子和羟基自由基等。活性氧的过度产生会损伤机体脂类、蛋白质和DNA等[1]。药用植物的抗氧化等性质在人类的健康研究中体现出重要的作用[2]。植物提取的黄酮类显示出抗氧化等性质[3]。大量研究表明，黄酮类化合物（如槲皮素、芦丁和柚木素等）有抗氧化和清除自由基的作用，改善氧自由基对组织的损伤，因而表现有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤和防治心血管疾病等多种药理作用[4]。有研究证明黄酮类体内抗氧化作用不显著[5]，这与体内的代谢酶有关，在一定程度上受到年龄、性别和疾病等的影响[6]。槲皮素是黄酮类家族中的一员，但难溶于水，生物利用度低，这些都限制了槲皮素的给药途径和临床应用。槲皮素-7-硫酸酯钠（SQMS）是人工半合成的槲皮素水溶性衍生物，刘文等[7]实验证明SQMS具有抗血小板凝聚，进而起到抑制血栓形成的作用。笔者前期研究发现SQMS在体外有较强的清除氧自由基、羟自由基和DPPH的作用，并对大剂量维生素C所致的DNA氧化损伤有保护作用[8]。本文进一步探讨SQMS对小鼠体外肝组织匀浆自氧化的作用。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　二列机智能水浴 ZKSY-1（巩义市予华仪器有限责任公司）；恒温振荡器（常州澳华仪器有限公司）；离心机（江苏正基仪器有限公司）；VORTEX-GENIE（Scientific Industries INS.）；BioTek酶标仪（美国）；电子分析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；NanoDrop spectrophotometer（NanoDrop 1000；NanoDrop Technology）。 　　1.2 试药 　　SQMS（由广东医学院生化教研室提供）；维生素C（Amreso，usp grade）；丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒均购买于南京建成生物工程研究所，其余试剂为分析纯。 　　1.3 动物 　　昆明小鼠由广东医学院动物中心提供。 　　2 方法 　　2.1 小鼠肝匀浆制备 　　小鼠禁食12 h后，脱颈椎处死，快速取出小鼠的肝脏，在冷生理盐水中反复漂洗，洗净肝组织上的残血和结缔组织，并用滤纸吸干组织表面的水分，称重，在冰浴上剪碎组织，加冷的生理盐水配置10%（W/V）的组织匀浆，4℃保存待用。 　　2.2 药物配置 　　SQMS配置成三个浓度，分别为0.10、0.25、0.5 mmol/L，维生素C浓度为0.25 mmol/L，空白组加等量的生理盐水。 　　2.3 MDA含量的测定 　　根据Su等[9]的实验方法，分别取1 mL肝组织匀浆，空白组加0.1 mL生理盐水，实验组分别向其中加入维生素C和不同摩尔浓度的SQMS溶液0.1 mL，振荡混均后置于37℃恒温水浴孵育1 h，取上清液按照MDA试剂盒说明书进行操作。 　　2.4 T-AOC的测定 　　分别取1 mL肝组织匀浆，空白组加0.1 mL生理盐水，实验组分别向其中加入维生素C和不同摩尔浓度的SQMS溶液0.1 mL，振荡混均后置于37℃恒温水浴孵育1 h，取上清液按照T-AOC试剂盒说明书进行操作。 　　2.5 SOD的测定 　　分别取1 mL肝组织匀浆，空白组加0.1 mL生理盐水，实验组分别向其中加入维生素C和不同摩尔浓度的SQMS溶液0.1 mL，振荡混均后置于37℃恒温水浴孵育1 h，取上清液按照SOD试剂盒说明书进行操作。 　　2.6 统计学方法 　　采用统计软件SPSS 13.0