137制备注射用脂质体的磷脂的技术要求.docxVIP

发布日期栏目 化药药物评价化药质量控制 标题 制备注射用脂质体的磷脂的技术要求 作者 张明平 部门 正文内容 张明平 审评四部七室 【前言】 脂质体(Liposomes) 是将药物包封入类脂质双分子层中而形成的一种超微型球状载体。作为药物载体使用的脂质体其成膜材料主要是一些天然或合成的脂质(磷脂和固醇等) 【1】 ,常用的天然膜材有卵磷脂(Lecithin ,Egg phospholipid) 、豆磷脂、胆固醇、角甾醇等,合成膜材有二肉豆蔻酰卵磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油等。影响脂质体膜稳定性的重要因素中，主要与磷脂相关的性质为“相变温度”和“电荷”，主要与工艺有关的是“粒径”；以及所载药物的物理和化学特性，外界温度、所处环境pH 、离子强度等。本文通过分析注射用脂质体的理化性质，提出了注射用磷脂的一些质控要点。 【磷脂概况】 磷脂作为构成脂质体的基本材料，对脂质体的理化性质有决定性的影响。磷脂是含磷酸根的脂类物质的总称【2】【3】。按结构可分为含甘油的甘油磷脂和含鞘氨醇的鞘磷脂两大类。鞘磷脂（SM）的分子结构中有酰胺键，在双分子膜中能形成氢键带，使形成的脂质体更加稳定，故国外脂质体产品的趋势是使用鞘磷脂代替甘油磷脂。但目前国内尚未有药用鞘磷脂产品上市。 甘油磷脂通常也称为“卵磷脂”（Lecithin），最早（1850年）用于命名从蛋黄中分离得到的一种物质（实际上不是单一成分）；因此，“卵磷脂”（Lecithin）是一个多义词，广义为磷脂的俗称，也可作为大豆磷脂的俗称，其成分可能包括有磷脂酰胆碱(PC) 、脑磷脂(PE) 、肌醇磷脂(PI) 、丝氨酸磷脂(PS)、甘油（PG）和磷脂酸( PA) 等。其狭义只指磷脂酰胆碱。其结构式如下图所示。 图1、磷脂结构示意图【4】 由图可见分子中在甘油桥中1－C和2－C与一对疏水的脂肪链经酯键连接。天然来源的PC的两条脂肪链在长度和饱和度上是不同的。通常植物来源的磷脂含较多不饱和脂肪酸，易被氧化；动物来源的磷脂饱和脂肪酸含量较高，不易氧化；且磷脂中的PS、PG、PA均带负电荷，其余为电中性。溶血磷脂（Lyso－PC）是我们重点关注的一类具有安全性隐患的物质；它是由PC经过水解，失去两条脂肪链中的某一条得到的。 【磷脂的物理性质】 每一种磷脂都有一个从有序的胶态(固态) 转变为液晶相的温度，称为相变温度( Tc)。温度超过磷脂的Tc ,磷脂脂肪酰链伸缩、弯曲、弯扭和侧向运动加速,膜结构处于“流体态”和“液晶态”,双分子膜从原来的紧密排列状态开始紊乱,膜刚性和膜厚度降低,膜通透性增加,包封内容物渗漏加剧。因此相变温度是磷脂最重要的一个理化性质。测量相变温度的经典方法是差示扫描量热法（DSC），但要注意测量结果与升温速率有关；随着升温速率的增加，吸热峰将向高温侧移动。不同磷脂的Tc 差异很大【5】，影响磷脂Tc 的因素一般认为是磷脂分子的链长、饱和度、头部基团（亲水或亲油基团）和一些二价离子。而不同的磷脂构成, Tc 的变化也是不同的。而且由于载药脂质体是由多种成分组成,因此其相变较单一成分的磷脂复杂得多。而我们更关注的是脂质体双分子膜作为一个整体所表现出的相变温度情况。当制备脂质体时应控制温度高于Tc，以便药物进入脂质体包裹起来；而平时存储过程中，应注意保持温度低于Tc，以减少药物的泄漏。 电荷【5】也是影响脂质体包封率和稳定性的重要因素。通常与磷脂膜带有相反电荷的药物离子具有较高的包封率；而相同电荷的药物离子则包封率较低，易渗漏。而脂质体的聚集度则与其Zeta电位和电阻有关。制备脂质体的磷脂按其所带电荷不同分为负电荷(酸性) 磷脂、正电荷磷脂和中性磷脂。但同样我们关注的是脂质体双分子膜作为一个整体所表现出的电荷情况。而脂质体的相变温度和电荷除了受到磷脂的相变温度和电荷情况影响外，还受到诸如离子强度，pH，添加剂，药物性质等诸多因素的影响。因此，磷脂的相变温度和电荷虽然并不一定需要作为质控指标订入质量标准，但有必要严格的控制磷脂中的各组分的比例和质量，以保证制备的脂质体的质量的均一性。 【磷脂的化学性质】 磷脂的化学稳定性直接影响了脂质体的稳定性。主要涉及两个问题【5】：氧化和水解。制备脂质体时应用的磷脂大多为各种磷脂的混合物,其中多数含有一定量的不饱和脂肪酸。一定条件下,一些氧化物质如氧、氧化自由基等极易使磷脂分子的不饱和脂肪酸键氧化断裂;而且磷脂的氧化程度随着磷脂含有的不饱和双键的数目和脂肪酸碳链长度增加而增加。脂质过氧化过程通常是一个链锁式反应,高温、光照、不适的pH、磷脂酶类、过氧化物酶类、一些金属离子/ 次氯酸盐和氧化自由基等物质的存在是加速诱导脂质体氧化水解反应的重要因素。氧化水解反应可发生于脂质体的制备、储存和应用过程中,如在脂质体制备