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月季“卡罗拉”组培快繁的研究
月季“卡罗拉”组培快繁的研究
摘 要:组织培养技术对于名优月季的迅速普及具有重要作用。本试验以 “卡罗拉”茎段为外植体进行月季组织培养技术研究,建立了“卡罗拉”组培快繁体系,研究表明,“卡罗拉”最适的离体芽诱导培养基是MS+BA0.8mg/L,不定芽增殖培养基是MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,生根培养基是1/2MS+IBA0.3mg/L。除了激素浓度及配比,芽高也影响组培苗生根,芽高2.5~4.0cm时生根效果最好。生根苗采用常温炼苗后移栽到基质泥炭和珍珠岩(体积比1:1)中,移栽成活率达70%。
关键词:月季“卡罗拉”;茎段快繁;组织培养;炼苗移栽
月季属蔷薇科多年生木本花卉,花姿优美,花型丰富,花色齐备,素有“花中皇后”之美誉,具有很高的观赏价值和商业价值。切花月季位居四大切花之首,多年来销售额稳居各类花卉的前茅。随着月季种植业的发展,对月季种苗的需求量越来越大。对于一些新培育和引进的优良品种,传统的扦插法及芽接法繁殖种苗受原材料数量限制,繁殖速度受到很大限制,短期内难以推广。而组培育苗具有繁殖速度快、幼苗质量好等特点,对于月季新品种的扩繁与大规模推广运用具有重要意义[1-3]。本试验以月季“卡罗拉”为材料进行组织培养技术研究,以期建立该品种快繁体系,同时为完善月季组培快繁技术以及大规模生产其它名优月季品种提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
选取江西金乔园林有限公司建设的江西月季产业园中月季“卡罗拉”当年生生长健壮的未开花枝条,去除顶部3个芽,其余部分去叶去刺后剪成带单腋芽的小段。
1.2 方法
1.2.1 腋芽诱导。将剪好的茎段用洗衣粉溶液浸泡1min,自来水冲洗干净,在超净工作台上用75%酒精消毒30s,无菌水冲洗1遍,再用0.1%氯化汞溶液浸泡10min,无菌蒸馏水冲洗4~5遍。切去茎段两端毒害的部分,接种于诱导培养基中。基本培养基为MS,设2个处理,分别添加6-BA 0.5mg/L和0.8mg/L,每处理接60个茎段。观察萌芽过程,10d后统计结果。
1.2.2 继代增殖。将长至2~3cm的丛生芽切成单芽,转接到增殖培养基中,基本培养基为MS,添加不同浓度的6-BA和NAA。共7个处理,每处理接20个芽,28d后观察并统计结果。
1.2.3 生根培养。将生长健壮,高度为2.5~4cm的丛生苗切单株,转入生根培养基中培养。基本培养基为1/2MS,添加不同浓度的NAA(0.1~0.6mg/L)或IBA(0.1~0.6mg/L),共13个处理,每处理20个芽,观察分化过程,14d后统计结果。确定最适生根培养基后,将继代培养中生长健壮、高2.5cm以上的无根苗切成单株,分为2.5~4.0cm、4.0~5.5cm、5.5~7.0cm共3组,转接到相同的生根培养基中,接种14d后观察幼苗的生根情况。
以上所有培养基均添加30g/L蔗糖,6g/L琼脂,pH值调至5.8左右。所有瓶苗在培养室中培养,培养条件为:25℃,光周期16h/8h,光强1500~2000lx。
1.2.4 炼苗移栽。当组培苗大多数根系长达0.8cm左右时,将其置于常温条件下炼苗3~5天,然后取出幼苗洗去植株根部残留的培养基,移栽到用0.1%的百菌清消毒的泥炭和珍珠岩(体积比1:1)基质中,移植后浇水使基质保持湿润但不积水,并用遮阳网覆盖。10d后逐渐揭膜炼苗,20d后调查成活率。
2 结果与分析
2.1 腋芽诱导
茎段接种5d后腋芽开始萌动,萌动后芽生长情况由于培养基内6-BA的浓度不同而不同。培养20d后,在MS+ BA 0.5mg/L的培养基中,80%腋芽分化出1个芽,20%的腋芽分化出2个芽。而在MS+ BA 0.8mg/L的培养基中,所有腋芽均分化出2~3个芽,丛生芽长势健壮。结果表明培养基MS+ BA 0.8mg/L适用于诱导“卡罗拉”萌芽。
2.2 继代增殖
在试验的BA浓度范围内,嫩芽的增殖倍数开始随着BA浓度的增加而增加,当BA达1.5mg/L后增殖倍数无明显变化。在相同浓度的BA条件下,NAA浓度对增殖倍数影响不大,但影响增殖苗长势。从增殖倍数和增殖苗长势等综合因素看, MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L是最适的不定芽增殖培养基(表 1) 。
2.3 生根培养
2.3.1 不同激素浓度对生根的影响。将月季幼嫩植株接到添加不同浓度的NAA或IBA的1/2MS培养基中进行生根培养。结果发现,在1/2MS+NAA(0.1~0.6mg/L)的培养基中培养的植株基部均产生许多愈伤组织,培养17d后才有部分植株在愈伤组织周围长出根,根短小而脆弱,表明NAA不适用于月季“卡罗拉”生根。
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