临床免疫学检验1.绪论.pptVIP

* * 原理 是用胶体金标记技术和蛋白质层析技术结 合，以硝酸纤维素膜为载体，但利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般。 最后通过胶体金的呈色条带 来判定实验结果。 试验所用试剂全部为干试剂，多个试剂被组合在一个约6mm×70mm的塑料板条上，成为一单一试剂条（图19-2），试剂条上端（A）和下端（B）分别粘贴吸水材料，免疫金复合物干片粘贴在近下端（C）处，紧贴其上为硝酸纤维素膜条。硝酸纤维素膜条上有两个反应区域，测试区（T）包被有特异抗体，参照区（R）包被有抗小鼠IgG。 —*— （Clinical Immunology) —*— 本学期授课教师： 徐霞(教研室主任）、杜晶春（教学秘书） 授课形式： 理论课—课堂讲授与讨论（免疫缺陷病及检验） 实验课—设计性、综合性实验及验证实验 考核形式：理论、操作、实验报告 、作业和讨论 期末总评=平时40%+考试60% 平时（100%）=实验报告（30%）+作业和讨论（30%）+实验操作考（40%） 参考书及网站：临床免疫学检验 王兰兰主编 人民卫生出版社（第5版）， 临床免疫学检验 康熙雄主编 高等教育出版社（第1版） Roitt IM,et al. Immunoglogy.6th.printed by MOSBY —*— 临床免疫学是将免疫学理论、临床医学疾病与免疫学技术相结合，用于研究疾病的免疫病理机制、诊断与鉴别诊断、疗效评价和预后判断的一门学科。 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学检验领域应用的一门学科 你知道吗？ —*— 临床免疫学检验 通过试剂、仪器、技术等进行检测，并对检测的过程进行全面的质量控制，最终得到可靠的检测结果或数据。 以方法的研究和改进为目的。 —*— 根据临床检验所得结果或数据，结合临床相 关资料和其他辅助检查，进行逻辑的分析和科学 的思维，最后为诊断疾病、科学研究和人群保健 提供客观依据。以检验的临床应用为目的。 临床免疫学诊断 —*— 临床免疫学检验的发展过程 一、临床免疫学检验的建立 二、现代临床免疫学检验的发展 (一) 临床免疫学检验技术日益先进 （二）免疫学检验的应用领域不断扩大 —*— 100多年的历史 1896年Widal利用伤寒患者血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象,诊断伤寒----肥大反应 1900年Landsteiner发现人ABO血型 1945年Coombs建立抗球蛋白试验用于溶血性贫血时红细胞不完全抗体的检测 由于当时制备的抗体都来源于免疫血清,检测标本也多采用血清,因此将体外的抗原抗体反应称之为血清学反应 临床免疫学检验的建立 —*— 试管法凝集反应—半定量试验： 诊断伤寒副伤寒的“肥达氏反应” 伤寒细菌悬液 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 对照 病人血清倍比稀释 —*— Ag Ab C Ag C RBC 溶血素 RBC 溶血素 C 不溶血 溶血 补体结合反应 是在补体参与下，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统，来检测未知抗原或抗体的血清学试验。 指示系统: 绵羊红细胞 +溶血素 +补体 待检系统 ：已知Ag+未知Ab 或已知Ab+未知Ag。 —*— 颗粒性抗原（细菌或细胞）与相应抗体直接结合所出现的凝集现象 ： （1）玻片法—定性试验：已知 Ab ? 未知 Ag(?) —*— Ag Ab 扩散 Ag Ab 扩散 1:2 1:4 1:8 1:16 1:24 1:64 双向琼脂扩散(双扩)： ----定性检测Ag或Ab ； Ab效价滴定 —*— 现代临床免疫学检验的发展 现代实验室的三大目标： 提供可靠数据 提供充分的检测项目 提供临床咨询 —*— 1.免疫标记技术提高了对抗原和抗体的检测水平:利用荧光素、酶、放射性同位素以及胶体金标记抗体，以检测相应抗原的技术。 2.与其他技术的融合促进了临床免疫学检验的发展 (一)临床免疫学检验技术日益先进 —*— 免疫荧光技术利用荧光素标记抗体或抗抗体以检测细胞表面或细胞内抗原的技术。 直接法 间接法 直接法:每检测一种抗原必须制备相应的荧光抗体 间接法:敏感性比直接法高,制备一种荧光二抗可用于多种抗原的检测 —*— 放射免疫测定法(RIA)示意图 Ag* Ab Ag 标记抗原 特异性抗体