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油菜化学杀雄剂的研究及的应用进展 　　摘要 介绍了目前油菜常用化学杀雄剂的种类，简述在细胞学、生理生化、基因工程三方面研究杀雄机理取得的进展，并简要介绍了杀雄剂生产应用中的注意事项。 　　关键词 油菜；化学杀雄剂；作用机理；应用 　　中图分类号 S565.4；S482.99 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）22-0063-02 　　1 油菜常用化学杀雄剂的种类 　　化学杀雄剂，又称化学杂交剂（chemical hybridizing agent，简称CHA），是用于自交作物中诱导雄性不育的化学试剂。CHA诱导产生雄性不育是作物杂种优势利用的主要途径之一。20世纪50年代发现马来酰肼可以导致玉米（Zea mays）雄性不育，随后各国学者相继开展CHA的开发工作。我国油菜化学杀雄剂利用杂种优势的研究始于20世纪70年代，湖南农学院是最早开展此项工作的单位。经过近几十年的发展，已经研制开发出一批油菜CHA并运用于油菜育种。目前，常用的CHA主要有以下几类：①无机盐类药物：MG5、氯化钠。不育株率可达80%～84%，但浓度较高的无机盐会对植株生长发育产生影响。②氯代脂肪酸类物质：茅草枯、二氯丙酸。这类杀雄剂产生不育株效率最高仅为63.3%，闭蕾现象严重，如果使用大量药物，影响雌蕊的结实。③磺酰脲除草剂类、氨基磺酸类：EN、EXP、ESP、BHL、SX-1、amidosulfuron、tribenuron-methyl。这类CHA具有广谱性，对雌蕊没有损害或者损害小，生产上应用最广。④激素类药物：乙烯利、2，4-D、GA3。其中，只有0.4% GA3在单核期处理诱导不育率高达88.4%，雌蕊结实正常。但GA3价格较高，生产上没有应用价值。⑤甲基胂酸盐类：MG1（杀雄剂一号）、MG2（杀雄剂二号），杀雄效果80%以上。⑥其他如KMS-1、三十烷醇、化杀灵可湿性粉剂、定军1号等。 　　2 油菜化学杀雄的作用机理 　　油菜化杀剂的研究主要侧重于研发和应用，对有关杀雄机理方面没有系统性的研究。 　　2.1 细胞学研究 　　研究发现杀雄剂处理过的花粉母细胞在分裂过程中绒毡层的发育发生异常，形成畸形花粉粒或者死花粉粒而导致不育。官春云等[1]用0.03%杀雄剂1号处理处于单核期的植株，不育株率接近100%。细胞学观察发现，CHA处理过的花药毡绒层偏离正常发育方式，导致出现异常毡绒层，从而产生各种形状的败育花粉。在高剂量处理过的细胞中还发现绒毡层的脱落，提前退化，致使小孢子失去营养来源。井 苗等[2]观察用0.5 μg/mL BHL化学杀雄后白菜型油菜143C花药的发育过程：在造孢期造孢细胞粘连，空泡化；减数分裂至四分体期，花药不发育，或绒毡层与花粉母细胞粘连变形；单胞、二三胞花粉期药室有少量畸形花粉粒，或死花粉粒或完全无花粉粒。 　　2.2 生理生化研究 　　罗敏昌等[3]通过比较正常植株和用化杀剂SX-1处理且不育率达100%的植株的叶片和花蕾的生理代谢过程发现，处理植株叶片叶绿素含量下降，叶片中脯氨酸含量增加，而花蕾中脯氨酸含量下降。范宝磊等[4]分别研究了新型CHA化杀灵WP处理过的油菜不育株中生长激素及内源激素含量变化与育性的关系。经化学杀雄剂WP处理后的不育系样品GA、IAA、ABA 3种激素含量明显比对照样品高，说明激素水平的显著变化导致了雄性不育的发生。刘志勇研究表明，乙烯释放量的变化与油菜雄性不育有直接关系。也有研究者人员揭示了CHA处理的不育植株体内酶活性与不育的关系。于澄宇等[5]研究指出，化学杂交剂EXP诱导的不育株花蕾的类胡萝卜素、叶绿素含量降低，处理雄蕊的过氧化物酶和酯酶活性下降，而水溶性蛋白质含量显著减少。胡文智等[6]对化学杀雄剂EXP诱导甘蓝型油菜品种秦油3号、L89雄性不育过程中叶片和花蕾中POD（过氧化物酶）、CAT（过氧化氢酶）活性以及过氧化氢、丙二醛含量进行了测定，发现活性氧代谢失调与化学杀雄剂EXP诱导雄性败育有关联性。范宝磊等对化学杀雄剂WP和YB诱导中双9号等油菜品种雄性不育过程中叶片和花蕾中POD（过氧化物酶）、CAT（过氧化氢酶）和SOD（超氧化物歧化酶）活性进行了测定研究，也得到同样的结论。聂明建等[7]研究发现，核糖核酸酶活力异常增强与甘蓝型油菜雄性不育有密切关系。 　　2.3 基因工程研究 　　研究人员试图利用基因工程技术探究某物质或某代谢过程与雄性不育的关系，也取得了一定的进展。将β-1，3-葡萄糖苷酶基因特异性导入绒毡层并使之表达，引起环绕小孢子的胼胝质提早降解，导致雄性不育，就证实胼胝质在小孢子发育中有重要作用。又如，将引起多胺合成变化的基因导入植物后，引起多胺合成改变以致造成雄性不育，就证实多胺与雄性不育有关。另外，通过其他方法研究发